基于G-三链体和MOFs材料荧光探针的构建及对核酸的研究

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核酸是遗传和病理分析中必不可少的生物活性分子,核酸的检测与确定对于癌症的早期检测和医学诊断尤其必要。因此,本论文基于G-三链体和金属有机框架材料构建了几种高灵敏的荧光生物传感器用于检测特定的DNA和miRNA。具体研究如下:1. 基于G-三链体的免酶免标记的放大策略用于荧光检测HIV-DNA基于G-三链体结构和催化发夹自组装放大(CHA)技术,我们发展了一种HIV-DNA荧光检测系统。发夹分子1(H1)可以充当与HIV-DNA结合的触发型的分子探针,它通过与目标物杂交产生的G-三链体可以与硫黄素T(ThT)结合,从而使ThT的荧光信号显著提高。该方法不仅具有良好的选择性,而且具有较宽的线性范围,检测限为33 p M。此外,该方法不需要复杂的标记且没有酶的参与,实用且简单。2. 基于金属有机框架材料UiO-66-NH2和三螺旋分子信标的生物探针用于miRNA的荧光检测在这项工作中,我们首先将DNA三螺旋分子通过共价作用与MOFs材料组装成R2-MOFs复合物。在没有miRNA-203的情况下,P1中修饰的染料FAM的荧光被MOFs材料猝灭,荧光信号降低。在miRNA-203存在的情况下,由于P1与miRNA-203杂交使得FAM远离MOFs材料,从而FAM的荧光回升。该方法对同种族miRNA具有高选择性,同时,所提出的荧光探针还被应用于生物实际样品检测,表明可以预期在临床诊断中的进一步应用。3. 基于金属有机框架材料ZIF-8的生物探针用于miRNA的比率型荧光放大检测在这项工作中,我们开发了一种基于金属有机框架材料ZIF-8的生物探针用于miRNA的比率型荧光放大检测。当Y-MOFs材料遇到酸性环境时,MOFs材料会发生分解,释放分子信标Y1和Y2。目标物先与Y1进行反应,使Y1中荧光共振能量转移效应消失,形成一种比率型检测效果。Y1-miRNA-21复合物继续与Y2发生反应,进而形成一种对目标物的比率型放大检测效果。该方法可以实现对目标物的高效灵敏的检测,检测限低至27 p M,同时,所提出的荧光探针还被应用于人体血清和细胞裂解液中进行检测,表明可以为临床中miRNA的诊断和检测提供更好的参考。
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