【摘 要】
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血小板无力症是由于血小板膜糖蛋白α Ⅱb β 3的基因缺陷引起的血小板对多种诱聚剂的先天性、遗传性无聚集或反应减低.该研究用重叠延伸PCR法对正常的α Ⅱ b-pcDNA3.1+质粒
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血小板无力症是由于血小板膜糖蛋白α Ⅱb β 3的基因缺陷引起的血小板对多种诱聚剂的先天性、遗传性无聚集或反应减低.该研究用重叠延伸PCR法对正常的α Ⅱ b-pcDNA3.1+质粒载体进行了体外定点诱变,并采用双酶切法将含突变的片段定向克隆至质粒载体片段中,构建了突变的α ⅡbA477P(A446P)-pcDNA3.1+质粒载体,并对α ⅡbA477P(A446P)cDNA进行了全长测序,测序结果证实α ⅡbA477P(A446P)-pcDNA3.1+突变体构建成功,未发生其他部位基因的突变及丢失.该实验资料表明:1、我们发现了一例发生于血小板无力症患者GT-57的基因突变--α ⅡbA477P(A446P),该突变系国内外首次报道;2、α Ⅱ bA477P(A446P)系致病突变,明显影响了αⅡ bβ3复合物表达至细胞膜表面,导致了血小板无力症的发生;3、我们推测α ⅡbA477P(A446P)突变可能通过引起β-螺旋的构型变化,妨碍了αⅡb和β3亚基发生稳定的结合;或者干扰β-螺旋末端和Thigh区之间可能存在的旋转枢轴、影响了α Ⅱb亚基保持正确的折叠构型等因素,明显影响了αⅡ bβ3复合物在细胞膜上的表达.
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