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研究目的八氢-9-苯乙酰胺基吖啶具有抗心律失常的作用,是9-氨基-1,2,3,4,5,6,7,8,-八氢吖啶的类似物。作为一种刚被研发不久的化合物,它的结构不同于已上市的抗心律失常药物。现有关于八氢-9-苯乙酰胺基吖啶研究的报道较少,本文建立了八氢-9-苯乙酰胺基吖啶的LC-MS/MS定量方法、探究了其在大鼠体内的药代动力学行为、对八氢-9-苯乙酰胺基吖啶进行了代谢产物鉴定,并以此为依据对其代谢途径进行了深入的探究,为其临床应用提供了理论依据。研究方案本论文建立了可靠的LC-MS/MS分析方法,并对其进行了方法学验证。本方法采用液-液萃取的方法对血浆样本进行处理,然后取20μL处理过的样本进行定量分析。色谱方法:本方法采用0.1%甲酸-水溶液作为水相,甲醇作为有机相,色谱柱选用SB-C18()5μm,4.6×150 mm,Agilent,USA,采用等度方法对待测物进行洗脱,有机相比例为60%。质谱方法:选用电喷雾离子化源(ESI),多反应监测(MRM)扫描方式,正离子检测模式,定量分析的离子对选择m/z 321.3/203.1(八氢-9-苯乙酰胺基吖啶)和m/z 264.3/58.2(内标曲马多)。该方法的定量浓度线性范围为2-300 ng/mL,本文对该方法残留、选择性、准确度与精密度、基质效应、提取回收率、稀释可靠性和样品稳定性进行了考察。本试验从以下四方面完成对八氢-9-苯乙酰胺基吖啶的研究:1)分别对大鼠灌胃、静脉给药,测定血药浓度,绘制药-时曲线并对其大鼠血浆药代动力学进行研究;2)测定并计算血浆蛋白结合率;3)计算大鼠经尿液和粪便中排除原形药物累积排泄量;4)鉴定八氢-9-苯乙酰胺基吖啶尿样中的代谢产物,研究八氢-9-苯乙酰胺基吖啶的在大鼠体内代谢过程和代谢产物。研究结果本论文对建立的LC-MS/MS方法进行了系统的的方法确证,结果表明:本方法准确可靠、重现性好、专属性强、提取回收率高,各浓度间相对稳定,几乎没有基质效应,在考察的保存条件下稳定,均可达到CFDA相关要求,可以应用于八氢-9-苯乙酰胺基吖啶的药代动力学研究。分别对大鼠灌胃和静脉给药后,测定血药浓度,经灌胃给药,消除半衰期为2.59±1.31 h,经静脉给药,消除半衰期为0.200±0.0200 h。灌胃和静脉给药,AUC分别为2398±1036 ng·h/m L和582±119 ng·h/mL,经计算得出其绝对生物利用度为8.2%;不同浓度八氢-9-苯乙酰胺基吖啶的血浆蛋白结合率为40%-50%;八氢-9-苯乙酰胺基吖啶基本不从尿液中排除,约24.1%的药物经粪便排除。经分析大鼠尿液样品,查找可能的代谢物时,推测出大鼠的5种可能的I相代谢物,及代谢通路。