温肺哮喘方对哮喘大鼠模型bcl-2和bax表达的影响

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研究目的在临床应用温肺哮喘方治疗支气管哮喘取得良好疗效的基础上,进一步观察温肺哮喘方对支气管哮喘大鼠调控基因Bcl-2和Bax表达的影响,探讨温肺哮喘方治疗支气管哮喘的可能机制。研究方法60只SD大鼠随机分为6组,即正常组(A组)、支气管哮喘模型组(B组)、温肺哮喘方低剂量组(C组)、温肺哮喘方高剂量组(D组)、氨茶碱组(E组)、桂龙咳喘宁组(F组),参考《动物实验造模》[1]加以改进建立动物模型:实验第1天和第8天给除正常组外大鼠腹腔内、腰部两侧注射卵蛋白(10%卵蛋白与氢氧化铝混合液2ml,腹腔1ml,腰部左右各0.5ml)致大鼠致敏。A组以等量生理盐水代替。造模第14天起用1%卵蛋白与氢氧化铝混合液100ml喷雾激发大鼠哮喘发作,雾化流量为5ml/min,20-30分钟/次,1次/日,连续2周。A组以等量生理盐水代替。第1次激发(第1次雾化),大鼠出现呼吸加快、口唇发绀、腹肌痉挛、点头呼吸及站立不稳等表现为激发成功。C组、D组、E组、F组均从第1次哮喘激发开始(造模第14天)连续14天每天灌胃给药, A组及B组均予等量生理盐水,C组予温肺哮喘方(麻黄、桂枝、细辛、干姜、白芍、五味子、法半夏、紫菀、款冬花、苦杏仁、当归、川芎、仙鹤草、巴戟天、肉苁蓉、仙灵脾等组成)浓缩成12.15g/kg,D组予温肺哮喘方浓缩成48.6g/kg,E组予氨茶碱混悬液0.027g/kg,F组予桂龙咳喘宁混悬液0.405g/kg。最后同时处死大鼠,应用TUNEL法检测肺组织嗜酸粒细胞(EOS)凋亡,免疫组织化学检测肺组织调控基因Bcl-2和Bax的表达。结果采用统计软件进行分析处理。研究结果1、肺组织EOS凋亡的影响:温肺哮喘方低剂量组和高剂量组大鼠肺组织嗜酸粒细胞绝对值计数显著低于哮喘模型组(P<0.01),低剂量组肺组织嗜酸粒细胞绝对值计数低于氨茶碱组(P<0.01),低高剂量组肺组织嗜酸粒细胞绝对值计数低于桂龙咳喘宁组(P<0.01),温肺哮喘方低剂量组显著低于温肺哮喘方高剂量组(P<0.01);2、肺组织调控基因Bcl-2的表达:温肺哮喘方低剂量组和高剂量组大鼠肺组织Bcl-2阳性细胞的比例显著低于哮喘模型组(P<0.01),低剂量组低于桂龙咳喘宁对照组(P<0.05),Bcl-2的细胞比例温肺哮喘方低剂量组、温肺哮喘方高剂量组、氨茶碱片组之间无显著差异(P>0.05);3、肺组织调控基因Bax的表达:温肺哮喘方低剂量组和高剂量组大鼠肺组织Bax阳性细胞的比例显著高于哮喘模型组(P<0.01),高剂量组、低高剂量组、桂龙咳喘宁组、氨茶碱组之间无显著性差异(P>0.05)。结论温肺哮喘方可显著减少支气管哮喘模型大鼠肺内EOS的募集和促进EOS凋亡,可能与其能抑制凋亡基因Bcl-2和促进凋亡基因Bax的表达相关。
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