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NAC (NAM, ATAF, CUC)是近十多年发现的一类植物特有的转录因子家族,参与植物的生长发育、衰老、次生代谢、激素调节和抗逆胁迫等生命活动过程。NAC转录因子最大的结构特征是N端含有约150个氨基酸残基组成的高度保守的NAC结构域。白羊草是一种优质的饲用牧草,本论文研究了NAC转录因子基因的克隆以及表达特性分析,并通过转基因技术获得转基因植株,为探讨和改良牧草对非生物胁迫的耐受性提供了理论依据和技术保障。研究结果如下：1.采用RACE的克隆方法,从白羊草中克隆到一个NAC转录因子基因,将其命名为BiNAC,并在Genbank中登录KF030136。具有1125bp的ORF区,编码由374个氨基酸组成的蛋白质。2.序列分析表明：白羊草BiNAC基因包含2个外显子和1个内含子,具有NAC类转录因子所特有的典型结构特征,与其它已知的NAC类转录因子基因在保守的结构域处具有很高的同源性。进化树分析表明,该蛋白属于ATAF亚族,与高粱的亲缘关系最近,同源性达到94%。3.采用实时荧光定量PCR的方法,分析了BiNAC基因在白羊草不同组织中的表达特异性,结果表明：白羊草BiNAC基因在三种组织中的表达存在差异性,在茎中表达最强,根中表达最弱。4.通过实时荧光定量PCR分析了BiNAC基因在逆境胁迫下的表达特性。实验结果表明：BiNAC基因在白羊草中能够被NaCl以及外源植物激素ABA诱导,初步推测BiNAC基因可能参与了白羊草对逆境的防御反应。5.构建表达载体pCAMBIA1302-BiNAC-GFP,进行亚细胞定位研究,结果表明：pCAMBIA1302-BiNAC-GFP融合蛋白集中分布在细胞核中,而对照pCAMBIA1302在细胞核和细胞质中均有分布,证明了BiNAC基因具有核定位的特性。6.构建表达载体pCAMBIA1302-BiNAC-GFP和pBI121-BiNAC-GUS,通过农杆菌介导法转化拟南芥,获得了转BiNAC基因的拟南芥植株。对转基因拟南芥T1代植株进行PCR检测和RT-PCR鉴定。结果表明,BiNAC基因已整合到拟南芥基因组中,并在转录水平正常表达。