microRNAs (miRNAs)是一类内源性的非编码小分子RNA,通过抑制蛋白编码的mRNA的翻译或者促进mRNA的降解来调节蛋白编码基因的翻译过程。目前已经预测,至少有三分之一的人类蛋白编码基因的表达受miRNAs所调节。目前,靶点预测软件预测到一个特异性的miRNA能够靶定上百个基因。由此看来,miRNAs非常有可能在许多细胞相关过程中发挥着重要的作用。同样地,如果miRNAs的表达失调也很有可能导致原本正常的细胞在生长以及分化等过程中出现异常,从而很容易导致许许多多疾病的发生,这其中就包括癌症这一大类顽疾。因此,鉴定与疾病相关的miRNAs的工作具有重要的意义,鉴定工作将非常有可能为理解疾病的发生发展等过程提供新的治疗方法。miR-23a-24-2-27a簇是一个基因间的miNRA簇,存在于脊椎动物的基因组中。该miNRA簇由三个成员组成,并在许多不同类型的细胞中参与细胞的周期调控与分化等。已有研究表明该miRNA簇在无论是半胱天冬酶依赖与否的信号通路中都具有促进凋亡的作用。但是,关于miR-23a-24-2-27a簇在癌症发生发展过程中的调节机制方面的研究依旧很少,并且有关miR-23a-24-2-27a簇的靶点基因的鉴定工作也非常少。因此,对miR-23a-24-2-27a簇的研究还有相当大的空白。Sprouty2(SPRY2)是Ras/MAPK信号通路的一个抑制因子,也是Sprouty家族四个成员之一,该Sprouty家族蛋白具有高度的保守性,能够在许多信号通路中发挥作用。目前,一些研究认为SPRY2在各种类型的癌症中出现表达失调的现象,例如,乳腺癌,肝癌,前列腺癌,等等。由此看来,SPRY2很可能是癌症发生发展过程中(包括细胞的生长,迁移和侵袭等过程)的一个至关重要的信号调节因子。针对上面的背景信息与研究现状,本文我们首先通过实时定量PCR方法检测了miR-23a-24-2-27a簇的三个成员在临床样本中的表达水平。结果发现miR-23a-24-2-27a簇的三个miRNA成员在具有淋巴结转移特征的乳腺癌病人样本中的表达水平显著高于没有淋巴结转移特征的乳腺癌样本以及正常组织样本中的表达水平。然后,我们通过先体外后体内的策略,采用Transwell Assay,尾静脉注射等实验技术,发现miR-23a-24-2-27a簇的三个miRNA成员能够促进乳腺癌的侵袭与迁移,甚至还促进乳腺癌细胞向肝脏中发生特异性转移。紧接着,我们验证了miR-23a-24-2-27a簇三个成员的作用机制。通过荧光报告基因检测(Luciferase reporter assay),实时定量PCR以及Western blot等实验技术,我们发现了miR-23a-24-2-27a簇三个成员的下游靶点SPRY2以及所调节的信号通路。进一步,我们验证了上游调控miR-23a-24-2-27a簇的三个成员的转录因子。通过荧光报告基因检测,实时定量PCR以及免疫沉淀(ChIP Assay)等实验技术,我们发现c-MYC转录因子能够促进miR-23a-24-2-27a簇三个成员的表达。最后,我们发现表皮生长因子(EGF)能够促进miR-23a-24-2-27a簇三个成员的表达,而且这种促进功能一部分是转录因子c-MYC的功劳。总结全文我们提出了一个线性模型：EGF促进转录因子c-MYC的表达,紧接着c-MYC的表达又促进了miR-23a-24-2-27a簇的转录,而转录的miR-23a-24-2-27a簇的三个成员又降低了靶点SPRY2的表达继而又促进了p44/42MAPK的活性,最终促进乳腺癌细胞的迁移与侵袭,以及向肝脏组织中发生转移。总结全文,我们提出了一个调节乳腺癌的侵袭和转移过程的新的网络,这个网络中包括表皮生长因子,miR-23a-24-2-27a簇以及c-MYC转录因子等因素。也因此非常有可能将miR-23a-24-2-27a簇基因作为乳腺癌的临床治疗或预后过程中的一个生物标记。