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本文对人肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导L929细胞死亡的机制进行了较为系统的研究，并对冬凌草甲素(Oridonin)诱导L929细胞死亡的机制进行了较为深入的探讨。同时本文也较为系统的研究了L929细胞对冬凌草甲素产生耐药性的机制。 在TNFα诱导L929细胞死亡实验中，我们首先精制纯化重组人TNFα，然后对L929细胞进行亚克隆并筛选出对TNFα高敏感的L929细胞株。实验结果表明，TNFα在体外能够明显地抑制L929细胞的增殖；形态学和核荧光染色方法观察到，TNFα作用后的细胞表现出部分凋亡特征；乳酸脱氢酶(LDH)活力测定和DNA片段化分析进一步肯定了TNFα主要通过凋亡途径诱导细胞细胞死亡。在某些外界刺激的作用下，caspase能够介导细胞凋亡，但在我们的研究中发现，caspase不仅未介导TNFα诱导的L929细胞凋亡，而且对细胞凋亡具有保护作用。caspase家族和caspase-3和-8的抑制剂均能够增强L929细胞对TNFα的敏感性，但caspase-9的抑制剂对此没有产生影响。在线粒体途径中，TNFα使Bcl-2和Bax蛋白的表达没有发生变化，表明线粒体途径未参与到此过程中。在TNFα诱导L929细胞凋亡过程中，细胞核内的DNA修复酶poly-(ADP-ribose)polymerase(PARP)未被降解。此外，MAPK家族成员中，p38激酶和细胞外信号调节激酶ERK被激活，从而促进细胞发生凋亡。 根据上述研究结果，我们对caspase家族抑制剂z-VAD-fmk增强TNFα对L929细胞细胞毒性的机制进行了探讨。在TNFα存在的条件下，z-VAD-fmk能剂量依赖性的增加细胞的死亡率。LDH活力测定和DNA片段化分析结果表明，z-VAD-fmk既能促进细胞发生凋亡，又能促进细胞发生坏死。线粒体膜通透性的抑制剂cyclosporine A抑制了细胞死亡率的增加，同时在TNFα存在的条件下，z-VAD-fmk使Bax蛋白的表达水平升高，但不影响Bcl-2和cytochrome c的表达。在TNFα存在的条件下，z-VAD-fmk能够引起c-Jun氮末端激酶JNK的激活，而使ERK的活力被抑制，提示JNK激酶的激活促进了细胞的死亡。虽然caspase的活性受到抑制，但z-VAD-fmk和TNFα引起了PARP的降解，提示从线粒体到细胞核内可能存在着一个未知的信号转导通路，引起PARP以caspase非依赖性