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目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、胰岛素样生长因子(insulihe-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)单独及联合应用对体外培养数代兔关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响,探讨传代多次的软骨细胞作为软骨组织工程种子细胞的可行性。 方法:第3、5、7代体外培养的兔关节软骨细胞,经b-FGF(1、5、10ng/ml)、IGF-Ⅰ(10、50、100ng/ml)及bFGF(5ng/ml)+IGF-Ⅰ(100ng/ml)单独刺激及联合刺激为实验组,常规培养作为对照组行细胞爬片培养,免疫组化法检测Ⅱ型胶原的定性表达,并通过图像分析作半定量分析。 结果:对照组细胞第5代以后无Ⅱ型胶原阳性表达。第3、5、7代软骨细胞在不同浓度的bFGF或IGF-Ⅰ刺激下,Ⅱ型胶原表达强度显著高于对照组(P<0.01);IGF-Ⅰ促进各代细胞表达Ⅱ型胶原的作用显著强于bFGF(P<0.01);bFGF和IGF-Ⅰ联合作用下,Ⅱ型胶原阳性表达强度显著高于使用bFGF或IGF-Ⅰ单独刺激组。 结论:bFGF和IGF-Ⅰ均能促进多次传代软骨细胞Ⅱ型胶原的表达,联合应用时促进作用更为显著,具有协同作用。多次传代软骨细胞在生长因子刺激下,仍有再分化的能力,而有成为软骨组织工程种子