定量检测端粒酶逆转录酶mRNA在肝癌中的表达水平及其对预后的影响

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背景与目的 原发性肝癌(Primary liver cancer,PLC)是中国最常见的恶性肿瘤之一,在肿瘤死亡原因中占第2位。目前,手术切除仍然是肝癌首选的治疗手段,但是即使是根治性切除,其术后复发率仍很高,生存率仍较低。如何判断肝癌预后是目前亟需解决的问题。肝癌预后的判断在于判断肝癌的生物学特性。研究表明端粒酶与恶性肿瘤发生发展有密切关系。端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)是端粒酶合成的限速酶,其表达与端粒酶活性呈正相关。研究表明,端粒酶表达阳性的恶性肿瘤预后差。hTERTmRNA的检测方法较端粒酶活性检测方便且精确。目前在肝癌中定量检测hTERTmRNA的报道较少见,本研究采用荧光定量逆转录PCR技术结合Taqman MGB probe技术,利用绝对定量的方法研究肝癌及癌旁组织中hTERTmRNA的表达,探讨定量检测hTERT mRNA水平与肝癌术后复发与长期生存的关系。 方法: 选取中山大学肿瘤防治中心2002年1月~2003年12月间手术切除的术后病理确诊为肝细胞癌的30例病例的肝癌组织和癌旁组织,用实时荧光定量逆转录PCR技术结合Taqman MGB探针法定量检测其hTERTmRNA的表达水平,利用统计学分析其与肝癌术后复发与长期的关系。 结果: hTERTmRNA在肝癌和癌旁组织中均可探测到表达,hTERT mRNA在癌组织中表达的中位数为523(3.5~9220)copies/ug;在癌旁组织中表达的中位数为153(12.9~1760)copies/ug。hTERTmRNA在癌组织和癌旁组织中的配对检验具有显著差异,hTERTmRNA在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织的表达(z=-4.001,p<0.0001);hTERTmRNA在肝癌组织和癌旁组织中的表达与性别、年龄、乙肝病毒感染、病理分级无明显相关性;hTERTmRNA在1年内复发的病例与1年内未复发的病例的肝癌组织的配对检验无统计学差异(z=-1.420,p=0.158);hTERTmRNA在1年内复发的病例的癌旁组织中的表达比1年未复发的病例的癌旁组织中的表达高,且有明显统计学差异(z=-2,518,p=0.011):3年生存的患者与死亡的患者间癌和癌旁hTERTmRNA的表达水平没有明显的统计学意义(p>0.05)。 结论: 荧光定量逆转录PCR法一种敏感有效的检测hTERTmRNA的方法;hTERTmRNA在肝癌组织中表达较癌旁组织中的表达明显高;hTERTmRNA在癌旁组织中的表达水平可能与术后早期复发相关;hTERTmRNA在癌以及癌旁组织中的表达水平与患者长期生存无关。
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