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目的：探讨慢性乙肝病人（chronic hepatitis B, CHB）和健康志愿者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）经异戊烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate, IPP）刺激后γδT细胞增殖、干扰素γ（interferon-gamma, IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha, TNF-α）分泌情况；研究经IPP刺激的PBMCs抗HBV（hepatitis B virus, HBV）的直接非溶细胞机制。 方法：（1）采集健康人或慢性乙型肝炎病人外周血，用Ficoll-Hypaque分离液分离PBMCs，用含10％新生牛血清（new cattle serum, NCS）和5%人AB型血浆的RPMI1640培养液重悬，调整细胞浓度为5×105/ml，补充IPP和重组人白介素2（recombinant human interleukin2, rhIL-2），置37℃、5% CO2培养10天，收集细胞，进行实验。采用流式细胞术检测培养前后γδT细胞百分比。（2）收集培养后1、4、7、10天的上清液，酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）检测上清液中IFN-γ和TNF-α含量。（3）在Transwell培养系统中将PBMCs与HepG2.2.15细胞按20:1孵育培养，加入或不加入抗人IFN-γ及TNF-α单克隆抗体中和细胞因子活性，收集48h，96h培养上清液，采用 ELISA法检测上清液中 HBsAg、HBeAg含量。（4）于96h提取各孔中HepG2.2.15细胞内HBV DNA和RNA，采用荧光定量PCR方法检测HBV DNA含量，采用半定量RT-PCR法检测HBsAg mRNA、HBeAg mRNA的表达。 结果：（1）经IPP刺激10天后，正常组和CHB病人组的γδT细胞百分含量分别从（4.80±0.65）%和（4.69±1.10）%增至（72.18±2.87）%和（66.61±6.67）%；两组间γδT细胞百分含量无明显差异（P>0.05）。（2）PBMCs在IPP刺激下IFN-γ和TNF-α分泌均较不含IPP的对照组有显著升高（P<0.05）。至第7天时，IFN-γ达到峰值，而TNF-α则呈逐渐下降趋势。（3）Transwell培养系统中，刺激后的PBMCs没有明显影响HepG2.2.15细胞HBsAg的分泌（P>0.05）；但其可显著影响 HBeAg分泌（P<0.05）。中和抗体实验显示，HBeAg的分泌在使用抗 IFN-γ单克隆抗体时与未使用组相比有明显升高（P<0.05），而使用抗TNF-α单克隆抗体则未见其明显升高，两者同时使用在96h时与对照组相比也有明显下降（P<0.05）。（4）对HepG2.2.15细胞内的HBV DNA检测显示，刺激后的PBMCs可显著减少HBV DNA的复制（P<0.05）；中和抗体实验显示，HBV DNA在使用抗IFN-γ单克隆抗体时与未使用组相比有明显升高（P<0.05），而使用抗TNF-α单克隆抗体则未见明显升高。（5）对HepG2.2.15细胞内HBsAg、HBeAg mRNA的检测结果显示，刺激后的PBMCs没有明显影响 HepG2.2.15细胞内 HBsAg mRNA的表达，但可显著降低HBeAg mRNA表达（P<0.05）。中和抗体实验显示，阻断细胞因子活性可显著升高HBeAg mRNA的表达（P<0.05）。 结论：（1）CHB病人外周血中的γδT细胞的百分含量和正常人无明显差异性。IPP联合rhIL-2对正常人和CHB病人中的γδT细胞均能有效刺激增殖。（2） IPP刺激PBMCs后能有效分泌IFN-γ和TNF-α。（3）IPP刺激培养后的PBMCs能够减少HepG2.2.15细胞HBeAg的分泌和抑制HBV DNA复制，但对HBsAg分泌的影响不明显。（4）IPP刺激培养后的PBMCs能够降低HepG2.2.15细胞中HBeAg基因的表达，但对 HBsAg表达无显著影响。（5）这种非溶细胞抗 HBV的机制主要是由PBMCs分泌的细胞因子发挥作用，中和抗体实验证实IFN-γ是发挥直接抗病毒作用的一个关键细胞因子。