1,25(OH)2VD3、降钙素对小鼠成骨细胞和软骨细胞增殖及OPG/RANKL/RANK表达影响的实验研究

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目的:1,25(OH)2VD3和降钙素对小鼠成骨细胞和软骨细胞增殖及OPG/RANKL表达的影响以及大鼠股骨干骺端中RANK表达的实验研究。方法:取出生24小时内的小鼠30只,无菌的条件下取出关节软骨和颅骨,应用酶消化法进行软骨细胞和成骨细胞的培养,在培养软骨细胞和成骨细胞的培养液中加入不同浓度的1,25(OH)2VD3或者降钙素,首先应用MTT法检测这两种药物对成骨细胞和软骨细胞增殖的影响,然后应用RT-PCR法检测其对OPG/RANKL mRNA的表达及ELISA法检测OPG蛋白分泌的影响。应用免疫组织化学染色的方法检测不同鼠龄的去势大鼠股骨干骺端中RANK的表达。结果:1,25(OH)2VD3可以抑制成骨细胞和软骨细胞的增殖。降钙素能促进成骨细胞和软骨细胞的增殖。1,25(OH)2VD3能抑制成骨细胞和软骨细胞中OPG mRNA的表达及增强RANKL mRNA的表达,并能促进成骨细胞中OPG蛋白的分泌;降钙素能增强成骨细胞中OPG mRNA的表达同时抑制成骨细胞中RANKL mRNA的表达,并能促进OPG蛋白的分泌,在软骨细胞中降钙素对OPG mRNA的表达没有明显的影响但能抑制RANKL mRNA的表达。在老年雌性大鼠的股骨干骺端皮质骨外膜中RANK的表达较12周鼠龄的股骨干骺端中RANK的表达减弱,骨内膜中RANK的表达在不同的鼠龄中变化不明显。在去势大鼠的小梁骨中RANK的表达较假手术组大鼠明显增强。结论:1,25(OH)2VD3能抑制成骨细胞和软骨细胞的增殖及OPG的表达,同时增强RANKL mRNA的表达。降钙素能促进成骨细胞和软骨细胞的增殖及成骨细胞中OPG mRNA的表达,同时抑制RANKL的mRNA的表达。雌激素缺乏可以增加大鼠股骨干骺端小梁骨中RANK的表达。
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