依达拉奉对肺移植模型中肺缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

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目的:采用改良兔在体肺保存模型,探讨氧自由基清除剂依达拉奉在肺移植模型中对肺缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法:选用健康成年家兔20只,体重2.5-3.0Kg(由江苏大学医学院动物实验中心提供),随机分为LPD液组和依达拉奉组两组,每组10只。建立兔在体肺保存模型,两组分别用低钾右旋糖酐液(LPD液)和含有依达拉奉的LPD液作肺灌注及保存。各组分别于缺血前、再灌注1h、2h取左下肺静脉血作血气分析检测血氧分压(PvO2);于缺血前、再灌注30min、60min、90min、120min取左下肺静脉血,离心,取上清夜,超低温冰箱保存,待集中检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS);术毕取左下肺相同部位肺组织约0.5g,称湿重,70℃烘干48h称干重,计算肺组织湿/干重比(W/D);另取两块左下肺相同部位肺组织光镜、透射电镜下观察组织形态结构变化。结果:1.肺静脉血氧分压比较:再灌注后各时点PvO2均较缺血前下降,但依达拉奉组明显好于同时点LPD液组,两组结果有统计学意义。(P<0.05)。2.MDA含量,SOD表达:两组再灌注后各时点MDA值均较缺血前升高,但依达拉奉组明显低于同时点LPD液组;两组再灌注后各时点SOD的表达均较缺血前下降,但依达拉奉组明显高于同时点LPD液组,两组结果均有统计学意义(P<0.05)。3.iNOS、eNOS表达:两组再灌注后各时点iNOS表达均较缺血前升高,但依达拉奉组明显低于同时点LPD液组;两组再灌注后各时点eNOS表达均较缺血前下降,但依达拉奉组明显高于同时点LPD液组,两组结果均有统计学意义(P<0.05)。4.肺组织湿/干重比:LPD液组与依达拉奉组兔肺组织湿/干重比比较显示,LPD液组高于依达拉奉组,有统计学意义(P<0.05)。5.光镜下肺组织病理改变:LPD组光镜下可见部分肺泡萎陷,肺间质水肿,肺泡间隔有较多炎细胞浸润,微血管扩张,血管内皮细胞水肿。依达拉奉组肺泡结构尚清晰,肺泡壁结构尚完整,局部肺泡上皮细胞轻度肿胀,血管内皮细胞结构保持完整,肺间质内可见少许炎细胞浸润,小血管扩张充血。6.电镜下肺组织病理改变:LPD液组肺泡间隔明显水肿增宽,组织疏松,肺泡腔内红细胞漏出明显,成堆分布,可见炎细胞大量浸润,Ⅱ型肺泡上皮细胞肿胀明显,表面微绒毛大部分脱落,胞浆内的板层小体排空严重,内皮细胞肿胀明显。依达拉奉组大部分肺泡组织结构正常,Ⅱ型肺泡上皮细胞轻度水肿,表面微绒毛少许脱落,板层小体部分排空,但少数肺泡腔内有红细胞渗出,可见到少量的炎性细胞浸润,内皮细胞轻度肿胀。结论:在兔在体肺保存模型中,依达拉奉能够提高机体清除氧自由基能力,有效降低肺缺血再灌注损伤,改善早期移植肺功能,将依达拉奉作为肺保护液添加剂是有效的。
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