卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，发病率在妇科肿瘤中居第三位，但死亡率高居妇科肿瘤之首，在女性全部肿瘤中居第六，严重威胁女性的生命健康。在我国，近年来卵巢癌的发病率呈逐年上升状态。由于卵巢癌的发病和进展隐匿，早期缺乏特异的临床症状和有效的筛查方法，多数就诊时已属晚期。虽经常规的手术、化疗、内分泌治疗等，卵巢癌的总体生存率始终没有明显改善，5年生存率仅徘徊在30％左右。究其根源，对卵巢癌的早期诊断困难以及肿瘤原发或化疗后的获得性耐药，是导致治疗失败的主要原因，并导致患者预后不良。研究表明，卵巢癌的发生、发展是一个多步骤、多因素参与的复杂过程，因此，从分子水平积极寻找卵巢癌相关的肿瘤标志物，对于研究卵巢癌的发病机制并探寻新的生物治疗靶点具有重要的意义。　　细胞凋亡是为维持机体内环境稳定，由基因控制的细胞程序性死亡，与肿瘤的关系十分密切。凋亡异常是肿瘤形成、化疗耐药的主要机制之一，细胞凋亡缺陷是恶性肿瘤得以发生发展的重要因素之一。凋亡抑制蛋白(IAP)家族是一类重要的凋亡抑制因子，能同时抑制线粒体凋亡通路和死亡受体调节通路。IAP直接作用于半胱氨酸蛋白酶(Caspase)级联反应的起始阶段或终末效应阶段，抑制Caspase反应活性，从而抑制凋亡的发生。X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitorof apoptosis protein，XIAP)因在IAP家族中作用最强、范围最广而备受关注。XIAP相关因子1(X-linked inhibitor of apoptosis protein associated factor-1，XAF1)是新近发现的一个能拮抗IAP功能的促凋亡蛋白，因首先被发现和XIAP结合，并抑制XIAP的抗凋亡作用，故而命名。研究还发现，XAF1可协同增强多种因子如肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素(IFN)等诱导的细胞凋亡，并可增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand，TRAIL)以及多种化疗药物如5-氟尿嘧啶（5-flurouracil，5-FU）、依托泊苷(Etoposide)等诱导细胞凋亡作用的敏感性。因此，XAF1被认为在主要凋亡相关通路中发挥着非常重要的作用。XAF1在人体正常组织中广泛表达，但在胃癌、黑色素瘤、肝癌、结肠癌、胰腺癌、泌尿系肿瘤等多种肿瘤组织和细胞中表达减弱或缺失，存在转录抑制现象，是一个潜在的抑癌基因。目前对XAF1在卵巢癌中的研究有限，阐明XAF1在卵巢癌中的表达情况及意义，将有可能为解决目前卵巢癌的相关问题提供新的依据。　　在本实验中，我们首先用免疫组化法检测了166例卵巢癌组织中XAF1的表达并分析与临床病理特征的相关性，随后我们应用脂质体转染法将XAF1过表达质粒瞬时转染至卵巢癌细胞株SKOV-3及其耐药株SKOV-3/DDP，进一步探讨XAF1在卵巢癌中的功能及作用机制。　　实验方法:　　1、应用组织芯片技术，通过免疫组化染色SP法，检测166例卵巢上皮性癌及14例正常组织中XAF1和XIAP的表达情况，并分析与临床病理特征的相关性;　　2、应用脂质体转染法将XAF1过表达质粒瞬时转染至卵巢癌细胞株SKOV-3及其顺铂耐药株SKOV-3/DDP，构建XAF1过表达细胞株;　　3、RT-PCR、Westem blot技术检测各组细胞XIAP的表达;　　4、Western blot技术检测各组细胞Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达;　　5、划痕实验检测各组细胞迁移能力;　　6、Transwell小室侵袭实验检测各组细胞侵袭能力;　　7、MTT法检测顺铂作用下各组细胞的增殖活力，并计算Ic50;　　8、Hoechst荧光染色观察细胞凋亡形态;　　9、流式细胞术检测各组细胞凋亡率;　　10、流式细胞术检测各组细胞周期;　　11、分光光度法检测凋亡效应酶Caspase-3、Caspase-9的活性。　　实验结果:　　1、免疫组化结果显示，XAF1在正常卵巢组织中呈高表达，而在卵巢癌中多呈低表达或不表达，与之相反，XIAP在正常卵巢组织中多呈低表达或不表达，而在卵巢癌中多数呈高表达。统计学分析显示，XAF1在FIGO分期晚期中的表达显著低于早期（P＜0.05），这表明XAF1可能与卵巢癌的疾病进展相关。而XIAP在卵巢癌组织中的表达与卵巢癌临床病理学参数均无明显相关性。　　2、将XAF1过表达质粒瞬时转染至卵巢癌细胞株SKOV-3及其顺铂耐药株SKOV-3/DDP中，RT-PCR及Western blot检测结果显示XAF1 mRNA和蛋白表达在转染后显著增加。　　3、RT-PCR、Western blot检测显示，过表达XAF1的SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞中，XIAP mRNA和蛋白表达显著降低。　　4、Western blot检测显示，在SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞中，XAF1过表达组Caspase-3、Caspase-9蛋白表达显著增加。　　5、划痕实验检测显示，在SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞中，XAF1过表达组肿瘤细胞迁移能力显著下降。　　6、Transwell小室侵袭实验检测显示，在SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞中，XAF1过表达组肿瘤细胞侵袭能力显著下降。　　7、向各处理组和对照组细胞培养基中添加化疗药物顺铂，MTT检测结果显示:(1)顺铂对各组卵巢癌细胞的生长抑制率呈时间-剂量依赖性，随顺铂浓度升高、作用时间延长而增加;(2)在24小时、48小时、72小时时间点上，SKOV-3/DDP组细胞的顺铂Ic50值明显高于SKOV-3组，印证了SKOV-3/DDP细胞株的顺铂耐药性。(3)在各时间点上，XAF1过表达的SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞顺铂Ic50值较转染空白质粒细胞株降低。　　8、Hoechst荧光染色观察在过表达XAF1的细胞中凋亡细胞的比例增加。　　9、流式细胞术对细胞凋亡检测显示，XAF1过表达组细胞早期凋亡比例显著升高。　　10、流式细胞术对细胞周期检测显示，XAF1过表达组细胞周期中G1/G0期比例升高，G2/M期比例降低。　　11、分光光度法检测凋亡效应酶显示，XAF1过表达组细胞Caspase-3、Caspase-9酶活性增强。　　结论:　　1、XAF1在卵巢癌组织中呈低表达，而XIAP在卵巢癌中呈高表达。并且在FIGOⅢ/Ⅳ期组织中的表达显著低于FIGOⅠ/Ⅱ期，提示XAF1可能与卵巢癌的发生发展有关。　　2、在卵巢癌SKOV-3和耐药株SKOV-3/DDP细胞中，过表达XAF1可以下调XIAP表达，增强凋亡起始效应酶Caspase-9和终末效应酶Caspase-3活性，促进细胞凋亡、抑制细胞增殖，增强其对化疗药物顺铂的敏感性，同时还可以降低肿瘤细胞迁移和侵袭能力。