【摘 要】
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目的:研究蒙药金诃子水提物及质量标准,及对胶原诱导性关节炎大鼠T细胞亚群及肠道免疫调节的影响,发现药物干预类风湿性关节炎作用的新靶点。 方法:建立诃子水提物质量研究方
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目的:研究蒙药金诃子水提物及质量标准,及对胶原诱导性关节炎大鼠T细胞亚群及肠道免疫调节的影响,发现药物干预类风湿性关节炎作用的新靶点。 方法:建立诃子水提物质量研究方法,检测鞣质、酚酸及多糖含量。采用Ⅱ型胶原诱导建立关节炎大鼠模型,并设正常对照组,模型组,雷公藤组(9.45mg·kg-1),诃子提取物高剂量组(4mg·kg-1剂量)、诃子提取物中剂量组(2mg·kg-1剂量)、诃子提取物低剂量组(1mg·kg-1剂量),连续给药4周。HE观察肠道的组织病理学形态,酶联免疫吸附法(ELISE)测定大鼠血清CD4与CD25的含量;免疫组织化学方法检测大鼠肠道内CD4、CD25的表达水平;肉眼计数小肠派氏小结数;PCR法扩增细菌V3-V4区16SrDNA,分析肠道细菌丰富度、Shannon、Chao指数及主要菌群分布。 结果:诃子水提物中诃子酸、没食子酸各占3.07%,2.30%,多糖占14.36%。模型对照组血清CD4及CD25的含量显著高于正常组(P<0.05);各用药组阳性表达较模型对照组均有不同程度的降低(P<0.05),诃子提取物高剂量组与雷公藤多苷片组相比无显著差异(P>0.05)。免疫组化结果示,CD4、CD25模型对照组与正常对照组有显著性差异(P<0.05),TG组及诃子水提物高剂量组与其他用药组相比,有统计学意义(P<0.05)。小肠派氏小结计数示:模型组较正常组提高(P<0.05),各治疗组均有不同程度下降,以诃子高剂量和雷公藤组下降最为明显,雷公藤组与模型组及诃子中低剂量组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。肠道菌群分析结果表明,各组大鼠其肠道菌群物种丰富度和多样性均较正常组下降。模型组,诃子中、低组与正常组的Chao指数对比有统计学意义(P<0.05),除雷公藤组外,其余组的Shannon指数较正常组,差异均有统计学意义(P<0.05),诃子高组,雷公藤组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论:诃子水提物质量标准研究,为该药合理开发利用奠定了基础。诃子水提物能明显缓解CIA模型大鼠关节红肿、溃疡现象,减轻大鼠关节炎表现,在一定程度上有效降低CIA大鼠血清及肠道组织CD4及CD25的表达及派氏小结数,可能通过调整机体内CD4、CD25影响细胞因子分布,及对肠道菌群失衡的调节来治疗RA,该点可能是类风湿性关节炎的作用机制之一。
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