Leptin是一种能够引起摄食减少、体内耗能增加、抑制食欲的代谢性激素，它不仅参与了体内生殖、免疫、造血、血管生成等多种生理活动，同样参与了骨代谢的调节过程。研究表明leptin一方面间接地通过下丘脑和交感神经系统产生抗成骨效应；另一方面直接作用于骨髓间质细胞，影响骨细胞间的平衡，促进骨形成或(和)抑制骨吸收。为观察leptin对体外培养破骨细胞的作用效应，本实验通过体外诱导小鼠破骨细胞生成，建立体外破骨细胞骨髓诱导培养体系；通过加入不同浓度的leptin，观察其对破骨细胞分化及功能的影响，探索leptin与骨代谢之间的关联。 本实验在无菌条件下取小鼠股骨肱骨，冲沈髓腔并收集骨髓细胞，然后放入塑料培养瓶中培养；再收集未贴壁细胞(骨髓单核细胞)，经离心、培养液重悬细胞、计数调整细胞浓度后放入培养箱中培养。实验中根据培养液中是否加入细胞因子巨噬细胞集落刺激因子(M—CSF，50ng/ml)和骨保护素配体(RANKL，50ng/ml)，并依据leptin浓度的不同分为：A组，M—CSF和RANKL；B组，M—CSF、RANKL和leptin(80ng/ml)；C组，M—CSF、RANKL和leptin(160ng/ml)：D组，M—CSF、RANKL和leptin(240ng/ml)；E组，M—CSF、RANKL和leptin(320ng/ml)； F组，M—CSF、RANKL和leptin(400ng/ml)；同时设立空白对照组G组。每间隔2天进行细胞换液；第7天取出玻片，进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色，在光镜下观察细胞形态并统计破骨细胞数量；第10天取出骨片进行戊二醛固定、甲苯胺蓝染液染色，在光镜和扫描电镜观察骨吸收陷窝。 本实验统计学结果提示：在加入细胞因子M—CSF和RANKL的组别(A—F组)中，破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积都与G组有明显的统计学差异(P＜0.05)；在A—F组中，A组破骨细胞数量和骨吸收面积较加入leptin的B—F组为多，A组破骨细胞数量与D组、E组和F组有统计学差异(P＜0.05)；并且A组骨吸收面积比与B组、C组、D组、E组和F组都有统计学差异(P＜0.05)；在B—F组中，leptin浓度在80 ng/ml至240 ng/ml范围内时，随着浓度的增加，破骨细胞数量和骨吸收面积有逐渐减少趋势，并以D组为最明显，B组、C组与D组相比有统计学差异(P＜0.05)；而当leptin浓度在240 ng/ml至400 ng/ml内继续增加时，破骨细胞数量和骨吸收面积有逐渐增加趋势，并且E组、F组与D组有统计学差异(P＜0.05)；同时B组、C组、E组和F组相互之间无统计学差异(P＞0.05)。 实验结果表明leptin能够抑制小鼠骨髓源性诱导培养的破骨细胞的分化及骨吸收功能，该效应在leptin浓度控制一定范围内效果尤其显著。这可能是leptin通过提高在单核细胞中骨保护素OPGmRNA和蛋白质表达，作用于系统RANKL/RANK/OPG，降低RANKLmRNA表达水平而实现的。本实验也表明M—CSF和RANKL两种细胞因子对破骨细胞形成和功能调节的重要作用。本实验为研究和防治临床中骨溶解和骨质疏松症提供了实验基础。