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第一部分:玄参-苍术对2型糖尿病模型大鼠的干预作用1目的与意义近年来,2型糖尿病（T2DM）已然成为继肿瘤和心脑血管疾病之后威胁人类生命健康的杀手,《施今墨对药》认为玄参-苍术具有良好的降糖疗效,本部分通过动物实验证实玄参-苍术的降糖疗效。2实验方法大鼠高脂饲料喂养8周后,禁食12小时,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg·kg-1),72h后监测尾静脉空腹血糖（FBG）,选择FBG≥16.7mmol·L-1的大鼠为合格T2DM大鼠模型,动物模型随机分为模型组,阳性药组,中药低剂量组,中药中剂量组,中药高剂量组,连同正常对照组进入实验,药物组分别连续灌胃给药2周,正常对照组和模型组灌胃同体积生理盐水,各组大鼠改为普通饮食喂养,给药前及给药期间每周监测大鼠FBG和餐后2小时（2hPG）血糖,将检测的数据进行整理,运用SPSS 22对数据统计分析。3实验结果相较于正常对照组,T2DM大鼠FBG、2hPG升高明显,组间差异存在统计学意义（P<0.05）,而相较于模型组大鼠,阳性药组大鼠和中药各组大鼠FBG、2hPG具有下降趋势,但组间差异均不具有统计学意义（P>0.05）。4研究结论（1）高脂饮食8周联合1%链脲佐菌素溶液30mg·kg-1腹腔注射的方式可成功建立T2DM大鼠模型。（2）单用玄参-苍术给药2周对大鼠FBG和2hPG的降糖效果并不显著。第二部分玄参-苍术联合二甲双胍对T2DM大鼠降糖增效作用1目的与意义通过第一部分研究发现单用玄参-苍术给药2周对大鼠FBG和2hPG的降糖效果并不显著,为避免实验的失败,本部分在第一部分的基础上进行实验方案的调整,以探索玄参-苍术联合二甲双胍对T2DM大鼠降糖增效作用。2实验方法第一部分的基础上,中药各组大鼠加用二甲双胍进行灌胃2周,监测血糖并统计学分析,玄参-苍术降糖疗效得以证实,继续灌胃2周后禁食12小时取血测鼠血清AST、ALT、GGT、尿素、TG、CHO、LDL-C、HDL-C水平,取血完毕后取出肝肾脏并称重,将检测的数据进行整理,运用SPSS 22对数据统计分析。3实验结果（1）对玄参-苍术联合二甲双胍给药前和给药2周血糖监测发现玄参-苍术联合二甲双胍给药2周后,相较于阳性药组,阳性+中药中剂量组大鼠FBG显著降低,组间差异具有统计学意义（P<0.05）,相较于模型组,阳性+中药低剂量组大鼠和阳性+中药中剂量组大鼠2hPG显著降低,组间差异具有统计学意义（P<0.05）,而相较于模型组,阳性药组大鼠血糖未见显著降低（P>0.05）,证实了玄参-苍术联合二甲双胍具有很好的降糖增效作用;（2）联合给药4周,相较于空白对照组,其余各组大鼠进食量、饮水量、肝重指数、肾重、肾重指数显著增加（P<0.05）,体质量显著降低（P<0.05）,与模型组及阳性药组相比,阳性+中药各组的进食量及饮水量均有所降低（P<0.05）,与模型组相比,阳性+中药高剂量肝重指数显著增加（P<0.05）,与阳性药组相比,阳性+中药中剂量组及阳性+中药高剂量组大鼠双肾重量有所降低（P<0.05）;（3）联合给药4周,阳性+中药低剂量组大鼠FBG和2hPG与空白对照组均最为接近,其余各组大鼠FBG和与2hPG空白对照组相比均显著升高（P<0.05）,各组大鼠在TC、HDL-C、TG方面无显著差异,相较于空白对照组,T2DM模型组大鼠血清LDL-C水平升高显著（P<0.05）,较之于模型组,阳性药组及阳性药+中药各组大鼠血清LDL-C水平均明显降低（P<0.05）,其中以阳性+中药低剂量组降低水平最为显著,各组大鼠在AST、GGT方面无显著差异,相较于空白对照组,阳性药组大鼠ALT、尿素升高最为显著,相较于阳性药组,阳性+中药中剂量组大鼠ALT、尿素水平显著降低（P<0.05）;（4）相关性分析发现大鼠血糖与多种因素相关,如FBG与饮水量、腹围、肝重、肝重指数、肾重指数、血清ALT水平、血清GGT水平、血清尿素水平成正相关,与体质量成负相关（P<0.05）;2hPG与进食量、饮水量、肝重指数、肾重指数、血清ALT水平、血清AST水平、血清GGT水平、血清尿素水平成正相关（P<0.05）。4研究结论（1）玄参-苍术具有显著的降糖增效作用;（2）玄参-苍术联合二甲双胍对T2DM大鼠的一般情况（如进食量、饮水量、体质量、肝肾重指数等）和生化指标（如FBG、2hPG、LDL-C、ALT、尿素等）均具有改善作用;（3）大鼠血糖与多种因素相关,如FBG与饮水量、腹围、肝重、肝重指数、肾重指数、血清ALT水平、血清GGT水平、血清尿素水平成正相关,与体质量成负相关;2hPG与进食量、饮水量、肝重指数、肾重指数、血清ALT水平、血清AST水平、血清GGT水平、血清尿素水平成正相关。第三部分玄参-苍术对T2DM大鼠肠道菌群结构的影响1目的与意义目前多数研究证实了T2DM患者中存在的菌群失调现象,通过第二部分研究发现玄参-苍术联合二甲双胍具有降糖增效作用,为探索玄参-苍术在降糖的同时是否对肠道菌群的结构进行了改变,我们进行了第三部分的研究。2实验方法收集联合用药大鼠新鲜粪便样本至密闭的粪便储存盒内置于-80℃冰箱冷冻保存,统一送至上海派森诺生物科技有限公司通过16s rDNA高通量测序技术对肠道菌群进行基因测序。3实验结果（1）较于正常大鼠,模型组大鼠布劳特氏菌属（Blautia）、Allobaculum、考拉杆菌属（Phascolarctobacterium）相对丰度显著升高（P<0.05）,Turicibacter、脱硫弧菌属（Desulfovibrio）相对丰度显著降低（P<0.05）,相较于模型组,阳性药组与阳性+中药各组布劳特氏菌属（Blautia）相对丰度具有降低趋势,但差异不具有统计学意义（P>0.05）,阳性药组与阳性+中药各组Turicibacter相对丰度显著升高（P<0.05）,其中以阳性+中药低剂量组升高最为明显;阳性+中药低剂量组罗斯氏菌属（Roseburia）相对丰度显著降低（P<0.05）;（2）标志菌属寻找发现空白对照组的标志菌属为片球菌属（Pediococcus）、棒杆菌属（Corynebacterium）、Odoribacter菌属;模型组的标志菌属为布不劳特氏菌属（Blautia）;（3）菌属之间相关性分析发现有益菌乳杆菌属（Lactobacillus）、萨特氏菌属（Sutterella）、副杆菌属（Parabacteroides）之间呈正相关,外来菌Turicibacter.、布劳特氏菌属（Blautia）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）、考拉杆菌属（Phascolarctobacterium）、脱硫弧菌属（Desulfovibrio）、片球菌属（Pediococcus）、棒杆菌属（Corynebacterium）、Odoribacter、Allobaculum等之间呈正相关,有益菌与外来菌之间呈负相关（P均<0.05）;（4）通过菌群与临床指标内在联系的PCA分析发现FBG和2hPG是驱动肠道群落变异的主要因子,而与FBG和2hPG呈正相关菌属有布劳特氏菌属（Blautia）、与FBG和2hPG呈负相关的菌属有片球菌属（Pediococcus）,与2hPG呈正相关的菌属有罗斯氏菌属（Roseburia）（均P<0.05）。4研究结论（1）T2DM大鼠与正常大鼠肠道菌群结构具有差异性,具体表现为T2DM大鼠布劳特氏菌属（Blautia）、Allobaculum、考拉杆菌属（Phascolarctobacterium）相对丰度显著升高,Turicibacter、脱硫弧菌属（Desulfovibrio）相对丰度显著降低;二甲双胍和中药药对玄参-苍术在降血糖的同时亦影响着肠道菌群的结构,具体表现为二甲双胍给药可升高Turicibacter相对丰度并具有降低布劳特氏菌属（Blautia）的趋势,中药药对玄参-苍术显著降低罗斯氏菌属（Roseburia）的相对丰度;（2）通过标志菌属的寻找发现正常大鼠的标志菌属有片球菌属（Pediococcus）、棒杆菌属（Corynebacterium）、Odoribacter,2型糖尿病大鼠的标志菌属为布劳特氏菌属（Blautia）;（3）通过菌群与临床指标内在联系的PCA分析发现FBG和2hPG是驱动肠道群落变异的主要因子,而与FBG和2hPG呈正相关的布劳特氏菌属（Blautia）、与FBG和2hPG呈负相关的片球菌属（Pediococcus）以及与2hPG呈正相关罗斯氏菌属（Roseburia）在驱动肠道群落的变异中起着举足轻重的作用,这三种菌属又与其他菌属和其他临床指标间有着千丝万缕的联系。