研究背景：肾结石是一种严重影响人体健康的临床常见病和多发病，虽然肾结石的诊断及治疗技术在过去的几十年中取得了巨大的进步，但其发病率和复发率仍高居不下，究其原因主要是由于目前对肾结石的发病机制还不明确，相关研究进展也较为缓慢。便捷、稳定的实验动物草酸钙结石模型是研究肾结石临床和基础研究的重要手段和工具，对探索肾结石产生和防治机制具有重要意义。近年来大宗的流行病学研究发现，肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病、尿pH值降低、高血压等代谢因素不单是肾结石发生的危险因素，而且还与结石的演进密切相关。目前代谢综合征中单个因素具体如何参与结石形成过程的研究相对薄弱。血脂异常作为代谢综合征的关键组成，其对结石生成的影响尚未见相关基础研究报道。从肾结石成分来看，人类肾结石主要以含钙结石为主，其中又以草酸钙结石最多，约占结石总数的80%。主流观点认为尿液中草酸钙晶体的成核、生长、聚集是草酸钙结石形成的主要机制。尿液中结石成分过饱和析出只是结石生成条件之一，在正常生理状态下，肾小管中的草酸钙晶体由于尿液的冲刷作用而随尿液排出，无法在肾小管中聚集形成结石，只有在肾小管上皮损伤情况下，尿中的草酸钙晶体才能够黏附、生长和聚集于肾内或肾乳头表面形成结石斑，并经过一系列反应最终生成草酸钙结石。因而，草酸钙结晶的沉积被认为是草酸钙结石生成的重要基础，建立一种成熟、稳定的草酸钙结晶模型对研究草酸钙结石早期生成机制具有重要作用。研究目的：通过腹腔注射乙醛酸盐来增加尿草酸排泄量，同时辅以肾小管损伤因素，摸索出一种造模时间短、结晶生成效果好的小鼠肾草酸钙结晶模型建模方法，并通过动物实验的方法来验证载脂蛋白E（Apolipoprotein E,ApoE)基因缺陷小鼠和低密度脂蛋白受体（Low Density Lipoprotein Receptor, LDLR)缺陷小鼠诱导的高脂血症是否促进乙醛酸盐诱导的肾脏草酸钙结晶的生成并探讨其可能作用机制。研究方法：第一部分通过给予C57BL/6、BABL-c、129S三种品系小鼠腹腔注射乙二醇体内代谢中间产物乙醛酸盐来增加尿草酸排泄量，同时辅以肾小管上皮细胞毒剂氯化铵自由饮水的方法建立小鼠肾草酸钙结晶模型。苦味酸-天狼星红染色观察肾组织纤维化情况。HE染色观察小鼠肾组织草酸钙结晶生成情况，并对各组小鼠肾组织中钙元素的含量进行定量检测。第二和第三部分分别采用ApoE基因缺陷小鼠和LDLR缺陷小鼠诱导建立高脂血症小鼠模型。并对两种不同的方案诱导高脂血症小鼠模型给予肾草酸钙结晶诱导方案，通过HE染色观察小鼠肾组织中草酸钙结晶生成情况，并测定肾组织以及血清中钙和维生素E含量，同时采用相关性分析方法评估小鼠肾组织中钙含量与血脂水平的关系，同时监测肾组织中骨桥蛋白（osteopontin,OPN）表达情况。检测肾组织中脂质过氧化丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）水平。研究结果：三种品系小鼠采用腹腔注射乙醛酸，同时辅以1%氯化铵自由饮水的结晶诱导方案，在给药7天后成功建立肾草酸钙结晶模型，苦味酸天狼星红染色结果提示肾组织存在纤维化表现。分别由ApoE基因缺陷和LDLR缺陷诱导的小鼠高脂血症加重乙醛酸盐诱导的肾脏草酸钙结晶的生成。免疫组化检测发现，相对于对照组，高脂血症组小鼠肾小管以及肾间质中OPN表达明显增加。另外在肾组织和血液中钙和维生素E含量检测中出现高脂血症小鼠模型肾组织中维生素E含量低，而血中含量高的维生素E器官吸收障碍表现。另外高脂血症组小鼠肾组织中GSH水平低于对照的野生型小鼠，MDA水平高于对照。研究结论：1.通过腹腔注射乙醛酸，并辅以氯化铵饮水的方法7天即可建立的实验性小鼠肾草酸钙结晶模型，该模型兼具急性肾损伤和慢性纤维化的特征，是一种造模时间短、成石效果好的小鼠结晶模型造模方案。2.ApoE基因缺陷和LDLR缺陷导致的小鼠高脂血症可以加重乙醛酸盐诱导的肾脏草酸钙结晶的生成；氧化/抗氧化平衡紊乱、全身性系统性促钙化因素可能是高脂血症促进小鼠结晶形成的作用机制。