慢性髓细胞性白血病（CML）是临床常见的恶性疾病。在我国，CML年发病率为0.36／10万，占各类白血病的20％。目前治疗CML的前线化学药物是2001年新上市的格列卫（Glivec，或称STI571）。但病人对格列卫的应答期较短，最终细胞对其耐药而使临床复发。因此，开发与格列卫不同作用机理，克服细胞产生耐药性的活性成分已成为当前CML治疗的迫切需要。 我们建立了一套适合大量微生物代谢物发酵，提取，筛选的方法，对从我国边远地区收集的土壤微生物进行了筛选。以Vero（非洲绿候肾细胞）细胞为正常对照细胞，以K562细胞及格列卫耐药K562细胞为靶细胞筛选对正常细胞／肿瘤细胞具有选择性抑制作用的代谢物。从中发现一株放线菌（Streptomyces sp．2215）的代谢产物提取物对K562细胞具有高抑制活性(IC₅₀=0.05μg／ml)，对格列卫耐药K562／Glc细胞（耐药倍数为25倍）生长，同样具有高的抑制作用(IC₅₀=0.036μg／ml)但对Vero细胞呈弱抑制活性(IC₅₀=0.92μg／ml)，具有选择性抑制作用。 我们对放线菌2215^#进行了发酵，发酵产物经过活性追踪分离得到一个高活性的化合物，对K562(IC₅₀=0.43ng／ml)、K562／Glc(IC₅₀=0.39ng／ml)有更强的抑制生长活性，但在相同剂量范围内对正常Vero细胞生长几乎不具有抑制作用，呈选择性抑制作用。通过1D-NMR，2D-NMR，高分辨ESI-MS，FAB-MS等方法鉴定结构为酯肽类抗生素—棘霉素（echinomycin）。该化合物经国内外研究证实对多种肿瘤细胞具有抑制作用，但对格列卫耐药的K562细胞作用还未见报道。 为进一步评价和应用echinomycin。我们进行了大规模发酵，优化了发酵条件并对发酵产物进行了制备研究。选用了10种不同成分的培养基进行摇瓶发酵，分别用HPLC测定含量，结合干湿重，OD值确定了发酵时间为4天。培养基组成为可溶性淀粉2.4％，葡萄糖0.1％，蛋白胨0.3％，牛肉膏0.3％，酵母提取物0.5％，CaCO₃0.4％，PH=7.0。我们以此条件进行了共33升的摇瓶发酵，棘霉素平均产率为6.07mg／L。在此基础上，进一步进行了100升大规模发酵罐发酵试验，菌株2215^#在该条件下生长良好，周期短，产量达12.6mg／L。发酵提取物经硅胶柱层析和制备型HPLC分离纯化得到棘霉素，含量