脑缺血预适应对大脑缺血再灌注损伤的远期保护作及HO-1的作用

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目的以大鼠实验性左侧大脑中动脉缺血性脑卒中(MCAO)为模型,研究脑短期缺血预适应(Ischemicpreconditioning,IPC)的长期保护作用并探讨HO~1(血红素加氧酶-1)和腺苷受体A1的作用。方法 Wistar 12周龄雄性大鼠,实验组夹闭左侧颈内动脉20min做缺血预处理,对照组夹闭左侧颈内动脉2s。实验组和对照组分别采用PBS、HO~1诱导剂Hemin、HO~1抑制剂Znpp、腺苷A1受体拮抗剂DPCPX处理,Hemin和Znpp用量为10Mmol·kg~1,皮下注射,预处理前1d开始,每3天1次;DPCPX用量为5mg·kg~1,皮下注射,术前3d和手术当天各注射1次。各组动物3周后均进行MCAO术,缺血45min,再灌注24h后取相应脑组织。采用神经功能评分、脑组织梗死面积(TTC染色法)评价缺血预处理和HO~1的保护作用;免疫组织化学,Western blotting方法检测HO~1及腺苷受体的表达变化,RTPCR检测14种炎症相关性细胞因子。结果 Longa神经功能评分表明,缺血预处理20min可明显改善大鼠MCAO术后神经功能损伤情况,脑梗死面积显著缩小。Hemin可以促进缺血预处理的保护作用。免疫组化结果显示HO~1、腺苷A1受体在脑梗死边缘区的表达量明显高于梗死区。Western blotting结果显示DPCPX可使HO~1和腺苷A1受体蛋白的表达量明显降低;Znpp可使缺血预处理后HO~1的表达量明显减少。而各组间炎细胞浸润和细胞因子表达无差异。结论首次发现短期脑缺血预适应对脑缺血再灌注损伤的有远期保护作用,至少可持续至3周;HO~1在脑缺血预适应的远期保护作用中起重要作用;HO~1和腺苷受体之间存在一定相关性,但它们之间的调控关系有待进一步研究。
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