BPA对小鼠腹腔巨噬细胞极化及IRF4和IRF5表达影响的体外研究

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:idcxinrui
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  [目的]探讨低剂量双酚A (BisphenolA,BPA)对体外诱导极化条件下小鼠腹腔巨噬细胞极化及其中干扰素调节因子4(interferon regulatory factor4,IRF4)和IRF5表达的影响,为阐明BPA诱导肥胖的发病机理提供实验资料.[材料和方法]提取雄性C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞,用10ng/mL干扰素-γ(IFNγ)和500 ng/mL细菌脂多糖(LPS)诱导其向M1型极化,用10ng/mL的白介素-4(IL-4)诱导其向M2型极化.加入诱导剂的同时用0.1、1和10 μmol/L BPA处理细胞,处理24 h后收集上清和细胞.流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测M1和M2型巨噬细胞比例,ELISA法检测上清IL-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、IL-10和精氨酸酶1(Arg-1)含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测IL-6,iNOS,MCP-1,CD11c,IL-10,Arg-1,CD206,IRF4和IRF5的mRNA水平,Western Blot检测IRF4和IRF5蛋白表达.[结果]在M1型极化诱导下,与对照组相比,1和10μmol/L BPA组M1型巨噬细胞比例明显增加,M1型巨噬细胞表面分子CD1 1c mRNA水平明显升高,M1型巨噬细胞分泌的IL-6,iNOS和MCP-1 mRNA水平和细胞因子含量均显著上升,IRF5 mRNA水平和蛋白表达均上调,而各组间IRF4 mRNA水平和蛋白表达差异均没有统计学意义.在M2型极化诱导下,与对照组相比,1和10μmol/L BPA组M2型巨噬细胞比例明显降低,M2型巨噬细胞表面分子CD206 mRNA水平显著下降,M2型巨噬细胞分泌的IL-10和Arg-1 mRNA水平和细胞因子含量显著下调,10 μ mol/L BPA组IRF4 mRNA水平和蛋白表达明显降低,而各组间IRF5 mRNA水平和蛋白表达差异均没有统计学意义.[结论]体外条件下,低浓度BPA能够促进小鼠腹腔巨噬细胞向M1型极化且其中IRF5表达上调,BPA也能够抑制小鼠腹腔巨噬细胞向M2型极化且其中IRF4表达下调.
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