苹果总RNA提取方法及主要病毒RT-PCR引物的选择

来源 :中国植物保护学会2011年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shinetar
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  苹果病毒病害在世界各地广泛分布,在我国各苹果产区普遍存在,严重影响果树的树势、产量及果品质量。在当今技术水平下,苹果病毒病尚无有效的防治药剂。采用脱毒方法,繁殖无病毒苗木,加强病毒检疫,是防治病毒病的唯一途径。目前,我国已明确了苹果主产区病毒病种类,并在病毒检测方面取得了一定的进展,但由于果树病毒在树体中含量低、分布不均、病毒分布受外界因素影响大、果树中含有多糖多酚等限制因素,真正能够应用到田间的准确、灵敏、快速的检测技术还有待进一步完善。分离和提纯果树组织中的RNA并以之合成cDNA,进行PCR扩增,是从分子水平上检测果树病毒的重要试验手段之一。但是,由于果树组织富含酚类、多糖等物质,在提取的过程之中,容易受到内源和外源RNA酶的降解以及蛋白质、DNA、同源和外源酚类物质的污染,且在应用RT-PCR检测果树病毒,总RNA提取的数量和质量是影响PCR检测效果的关键因素。
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