TGF-β1siRNA干预对BPD模型鼠肺损伤TGF-β1基因表达的影响

来源 :'2008北京医学会围产医学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiqt001
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目的:探讨TGF-β1siRNA干预技术对BPD模型鼠肺损伤TGF-β1基因表达的影响。 方法:建立BPD模型,RT-PCR从鼠肺组织扩增鼠cDNA,构建含TGF-β1目的DNA的真核表达载体pMD-18-T/TGF-β1,基因测序后合成TGF-β1siRNA,并转染鼠肺纤维细胞,导入鼠肺组织。荧光显微镜观察TGF-β1siRNA在鼠肺组织的表达,实时定量荧光PCR检测肺纤维细胞TGF-β1基因表达变化。 结果:BPD模型中,肺泡壁较薄,结构简单化,数目明显减少,肺泡大小不均,有些肺泡融合,体积增加,肺泡中有红细胞和巨噬细胞渗出,并可见脱落的肺上皮细胞。成功克隆了鼠cDNA,构建真核表达载体pMD-18-T/TGF-β1,并人工合成TGF-β1siRNA。TGF-β1siRNA转染鼠肺纤维细胞后,可显著抑制鼠肺纤维细胞TGF-β1基因表达;可成功导入TGF-β1siRNA到鼠肺组织。 结论:成功建立BPD模型3d新生鼠暴露于高氧环境(95%),可导致肺泡化停滞;TGF-β1siRNA可导入鼠肺组织,TGF-β1siRNA可抑制肺细胞TGF-β1基因表达,TGF-β1siRNA可望成为基因治疗BPD的新手段。
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