【摘 要】
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目的 钙调蛋白作为一种钙离子受体蛋白,是真核细胞信号系统中非常重要的调控蛋白之一,参与调控多种生理活动,其生物学效应的关键是能够结合相应的目标蛋白,诱导生物学活
【机 构】
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四川农业大学动物医学院动物寄生虫病研究中心,成都 611130
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
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目的 钙调蛋白作为一种钙离子受体蛋白,是真核细胞信号系统中非常重要的调控蛋白之一,参与调控多种生理活动,其生物学效应的关键是能够结合相应的目标蛋白,诱导生物学活性的改变,并参与调控与钙代谢有关的活动.本研究旨在探讨解细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)的钙调蛋白分子特征.方法 从细粒棘球绦虫的中绦期幼虫(细粒棘球蚴)的总RNA中扩增钙调蛋白基因并进行院核表达,应用荧光免疫组化方法观察钙调蛋白在细粒棘球绦虫体内的分布以及钙离子结合实验.结果细粒棘球绦虫钙调蛋白基因的ORF框有450bp,共编码149个氨基酸,天然钙调蛋白的分子质量为16.8KDa,其氨基酸序列与多房棘球绦虫的钙调蛋白序列相似性高达100％.在大肠杆菌中表达的重组钙调蛋白分子质量大约为20KDa,能够与人工感染细粒棘球蚴的小鼠阳性血清发生反应,具有一定的免疫原性.荧光免疫组化结果显示钙调蛋白主要分布在原头蚴的表皮层下方和生发层,成虫虫体的表皮层以及虫体内部.重组钙调蛋白与钙离子结合后,在SDS-PAGE中显示出变快的电泳迁移率,非变性电泳中显示出变慢的电泳迁移率.该蛋白与钙离子结合后,重组钙调蛋白的构象也发生了变化.结论 本研究为进一步了解细粒棘球绦虫钙调蛋白的功能以及作为疫苗候选抗原的潜力提供了基础资料.
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