痰热清注射液对脂多糖所致大鼠气道炎症和粘液高分泌过程的干预作用及剂量效应关系的初步研究

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目的:观察LPS所致大鼠气道炎症和粘液高分泌的作用及其特点,研究痰热清注射液对LPS所致大鼠气道炎症和粘液高分泌过程的干预作用及剂量效应关系。方法:SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为空白对照组、模型组、低剂量痰热清干预组、高剂量痰热清干预组,每组12只大鼠。空白对照组气道内注入120μl NS,模型组采用气道内注入120μl大肠杆菌LPS建立气道炎症和粘液高分泌模型,干预组在建立模型前的1小时及此后每24小时分别给予低剂量(2.8ml/kg)、高剂量(5.6ml/kg)痰热清注射液腹腔注射。在气道内注射NS或LPS后24小时、48小时、96小时随机处死动物(每批次每组4只),留取BALF和肺组织,选择BALF的细胞总数、中性粒细胞数、细胞因子IL-1β、CINC-1、TNF-α水平及支气管肺组织HE染色病理改变作为气道炎症的观察指标,测定BALF的总蛋白和Muc5ac定量、气道AB-PAS粘液物质阳染相对着色面积、免疫组织化学检测气道上皮Muc5ac蛋白表达及实时荧光定量PCR方法检测肺组织Muc5ac mRNA的表达作为气道粘液高分泌的观察指标。结果:空白对照组在气道内注射NS后24、48、96小时BALF的细胞总数、中性粒细胞数、细胞因子IL-1β、CINC-1、TNF-α水平、肺组织HE染色病理改变、BALF中蛋白质渗出及Muc5ac分泌、气道AB-PAS阳染颗粒相对着色面积、气道粘蛋白Muc5ac表达和肺组织Muc5ac mRNA表达均在低水平,无明显变化。模型组在气道内注射LPS后24小时气道炎症指标急剧升高,达到高峰,48小时开始下降,但仍保持较高水平,于96小时进一步下降,其中TNF-仅水平已降至空白对照组水平。模型组在气道内注射LPS后24小时气道粘液高分泌指标开始增高,48小时进一步增高,96小时达到高峰。在同一观察时点,给予痰热清注射液干预后,气道炎症和粘液高分泌指标均较模型组有所减轻,且高剂量痰热清较低剂量痰热清干预效果更明显,痰热清注射液对LPS所致气道炎症的抗炎效应和抑制粘液高分泌效应存在一定的剂量效应关系趋势,但两组间差异无统计学意义。结论:气道内注射LPS后24小时气道炎症急剧增高达到高峰,48小时逐渐下降,于96小时进一步下降。而气道粘液分泌在气道内注射LPS后24小时开始增高,48小时进一步增高,96小时达到高峰。痰热清注射液可以减轻LPS所致的气道炎症和粘液高分泌,其抗炎效应和抑制粘液高分泌效应存在一定的剂量效应关系趋势,但剂量效应关系及分子机制尚有待于进一步探讨。
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