【摘 要】
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目的：研究苦参碱衍生物M19对致死性剂量内毒素引起的全身性炎症的作用及其机制。方法：通过腹腔注射LPS(10-15mg/kg)建立内毒素致死性小鼠模型；采用LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264.7巨噬细胞系的炎症模型；以Griess法检测NO含量；用ELISA法检测IL-6、IL-10、IL-12p40的含量；用Western blot法检测蛋白的表达水平。采用RNAi干扰技术敲减小鼠巨噬细胞
【机 构】
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Deparment of Biochemical Pharmacy,School of Pharmacy,Second Military Medical University,Shanghai 200
【出 处】
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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会成立30周年纪念大会暨2012年学术年会
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目的：研究苦参碱衍生物M19对致死性剂量内毒素引起的全身性炎症的作用及其机制。方法：通过腹腔注射LPS(10-15mg/kg)建立内毒素致死性小鼠模型；采用LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264.7巨噬细胞系的炎症模型；以Griess法检测NO含量；用ELISA法检测IL-6、IL-10、IL-12p40的含量；用Western blot法检测蛋白的表达水平。采用RNAi干扰技术敲减小鼠巨噬细胞RAW264.7中RPX基因表达。结果：(1) M19(1,10mg/Kg)能显著预防和治疗LPS的致死作用，降低内毒素血症小鼠血清谷丙转氨酶水平，抑制内毒素血症小鼠升高的IL-6, IL-12水平，并显著提高IL-10水平；(2)体外M19(1-10μM)显著抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264.7巨噬细胞系释放NO,IL-6和IL-12，促进IL-10产生；M19剂量依赖关系地抑制LPS诱导p-AKT,p-JNK,p-ERK,p-P38的磷酸化水平；(3)采用RNAi干扰技术敲减M19的特异性结合蛋白RPX基因表达，能增敏LPS促进NO, IL-6和抑制IL-10的产生，同时组成性增加p-AKT-T308和S473磷酸化水平；而且RPX敲减可使LPS刺激的Akt-T308 , Akt-S473 , ERK和P38磷酸化水平进一步增加，但降低LPS上调的磷酸化JNK水平；(4) RPX敲减减弱M19的作用。结论：M19预防和治疗LPS的致死作用至少部分通过其特异性结合蛋白RPX，抑制LPS诱导的Akt和MAPK通路以及炎症介质和细胞因子产生有关。
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