应用稳定表达期特异性双荧光蛋白的转基因弓形虫判定虫体在体内外的期转换

来源 :上海市畜牧兽医学会2013年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wanyu123456
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  在活的宿主脑组织内检测弓形虫从速殖子向缓殖子转化是困难的,因为虫体很小并且虫体的转化与激活是瞬间发生的.为了更好的阐明弓形虫速殖子与缓殖子间相互转换机制,并且更好的识别虫体在中间宿主中的发育时期的转换,我们利用弓形虫包囊形成株(PLK)构建了一个转基因虫体.转基因弓形虫应用速殖子时期特异性表达的表面蛋白(SAG1)基因启动子和缓殖子时期特异性表达的表面蛋白(BAG1)基因启动子,在速殖子时期稳定表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和在缓殖子时期稳定表达红色荧光蛋白(RFP).该转基因虫体被命名为PLK/Bi.体内外实验表明PLK/Bi在速殖子期仅表达绿色荧光,而在缓殖子期仅表达红色荧光.荧光分析结果表明重组的GFP和RFP定位到虫体的空泡腔内.此外,对转基因弓形虫进行了体外的生长和培养条件的分析,以及体内毒力的评估.我们的数据表明PLK/Bi的期特异性荧光表达是个合理的设计,将应用于研究弓形虫在体内外的转换和激活机制.
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