大鼠小肠上皮细胞的原代培养方法

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<正> 一般取材于胚胎或新生大鼠的小肠,以胎鼠最为常用。选用DMEM培养基,添加5%胎牛血清、2mmol/L谷酰胺、2μg/ml胰岛素、20mg/ml EGF、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素。初生大鼠以70%乙醇溶液浸泡消毒1min。经腹正中切口取出小肠置于清洗液中,纵行剪开肠管,剪成1mm~3大小的组织块,加入20ml酶消化液,于37℃下振荡消化30min。用吸管反复吹打消化组织块3~5min,以1000r/min离心5min,再用细胞洗涤液反复吹打,移入20ml分离管,每管加入10ml组织分散液,吹打均匀,
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