【摘 要】
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目的:尝试建立诱导入骨髓问质干细胞(BMSCs)向神经干细胞分化的体外培养方法,为细胞移植修复神经系统损伤提供种子细胞.方法:原代贴壁培养成人BMSCs,传代至第4-10代时,用消化分离液将细胞分离,用神经干细胞培养基(含B27,EGF,bFGF)抗贴壁诱导培养.将诱导培养的神经球(neurospheres)代扩增.用免疫荧光染色和蛋白质印迹法,对神经球细胞表达神经干细胞标志蛋白的水平进行检测和比
【机 构】
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上海长海医院骨科 200433上海市
【出 处】
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第三届全国脊髓损伤治疗与康复研讨会
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目的:尝试建立诱导入骨髓问质干细胞(BMSCs)向神经干细胞分化的体外培养方法,为细胞移植修复神经系统损伤提供种子细胞.方法:原代贴壁培养成人BMSCs,传代至第4-10代时,用消化分离液将细胞分离,用神经干细胞培养基(含B27,EGF,bFGF)抗贴壁诱导培养.将诱导培养的神经球(neurospheres)代扩增.用免疫荧光染色和蛋白质印迹法,对神经球细胞表达神经干细胞标志蛋白的水平进行检测和比较.并对神经球的分化能力进行鉴定.结果:抗贴壁诱导培养可使BMSC。形成神经球，初级神经球传代可扩增形成次级神经球。神经球细胞高表达nestin和and musashi-1。将神经球和星形胶质细胞共培养后发现可分化为，诱导后可分化为神经元(β-微管蛋白3阳性)、星形胶质细胞(GFAP阳性)及少突胶质细胞(O4阳性)。结论:含B27, EGF, bFGF的神经干细胞培养基诱导培养可使成人BMSCs形成神经球，神经球细胞具有神经干细胞的标记抗体并能进一步分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞，该方法可为细胞移植修复神经系统损伤提供大量的种子细胞。
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