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目的:研制抗破伤风毒素C片段(TetC)的单克隆抗体(mAb)。
方法:以纯化蛋白His-TetC免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克隆。Western-blot鉴定单抗的特异性,并用单克隆抗体亚类试剂盒鉴定mAb亚类。
结果:共获得5株稳定分泌抗TetC的杂交瘤细胞株,分别命名为1E5、5G10、6B9、7D6、7F5,其腹水效价除1E5为3×210外,其余均为1×105,亚类鉴定结果均为IgG1。Western-blot分析结果显示,5株mAb均与融合蛋白His-TetC发生特异性反应。
结论:成功制备了抗TetC的mAb,为进一步研究TetC的生物学功能、破伤风毒素结构与功能的关系以及建立快速检测破伤风抗毒素水平的方法奠定基础。