游泳运动对Sigma1R介导的糖尿病小鼠骨骼肌线粒体-内质网功能的影响

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目的:本研究通过建立2型糖尿病小鼠模型结合6周的游泳运动,分别检测线粒体质量,内质网应激关键分子,以及内质网-线粒体间系带蛋白复合体MAMs的关键定量分子-Sigma1R,从而对线粒体-内质网的交互作用在糖尿病发病以及运动改善糖尿病机制中的作用进行初探,期待为运动促进健康的分子机制研究提供新的思路和实验依据。方法:选用清洁级4周龄C57/6BL雄性小鼠39只,随机分为对照组和糖尿病组,采用高脂饲料+STZ注射(50mg/kg/天)建立糖尿病模型。随后将小鼠分为安静组(C),运动组(E),糖尿病安静组(D),糖尿病运动组(DE)组,n=8。运动组小鼠进行为期6周的游泳运动,1h/天,5天/周。训练结束后小鼠禁食12h并处死,取材腓肠肌,检测线粒体膜电位,Sigma1R,内质网应激相关分子pPERK, pIRE1, ATF6。实验数据采用Graphpad Prism5.0软件进行单因素方差分析和相关性分析。结果:与C组相比,E组小鼠骨骼肌线粒体膜电位增高(P<0.05),D组则显著下降(P<0.01);与C组相比,E组小鼠骨骼肌Sigma1R的蛋白含量升高(P<0.05),D组则显著降低(P<0.001),而与D组相比,DE组则有升高的趋势(P=0.07);与C组相比,D组小鼠骨骼肌pIRE1(P<0.001)和ATF6(P=0.07)的蛋白含量均显著增高,而与D组相比,DE组pIRE1(P<0.05)和ATF6(P=0.05)的蛋白含量降低,pPERK的蛋白含量无显著差异;Sigma1R的蛋白表达与线粒体膜电位呈正相关(R2=0.4901, P<0.05),ATF6的蛋白含量亦与Sigma1R的蛋白含量呈现负相关趋势(R2=0.2658, P=0.06)。结论:1.运动可提升正常小鼠骨骼肌的线粒体功能,糖尿病则显著损害了小鼠骨骼肌的线粒体功能,诱导小鼠骨骼肌出现剧烈的内质网应激,游泳运动则可以缓解此现象。2.糖尿病小鼠骨骼肌内异常的内质网和线粒体功能,以及游泳运动对其的改善作用很可能是通过内质网-线粒体的交互作用(MAMs)实现的。
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