淫羊藿甙对MCF-7细胞侵袭转移的影响及机制

来源 :湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vpvplp
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目的:淫羊藿(ICA)是小檗科多年生草本植物,别名仙灵脾,是具补肾壮阳,祛风除湿功效的特色传统中草药。本实验中着重观察ICA对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力的影响,研究在这一过程中ICA对血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated phosphoprotein,VASP) 表达水平以及Rac1活性的影响,并进一步探讨Rac1活性与VASP表达之间的关系。 方法:体外培养乳腺癌细胞系MCF-7: (1) 培养基中加入不同浓度ICA(0,10,25,50,100μg/ml) 或多西紫杉醇(docetaxel)(0.05μg/ml)作为阳性对照,24 h后用细胞侵袭实验和损伤修复实验分别观察不同处理组中MCF-7细胞的侵袭和迁移能力的差别; (2) 培养基中加(或不加)入ICA(50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF(15 ng/ml) 刺激15 min,Western blotting和RT-PCR分别检测各组细胞中 Rac1和VASP在蛋白和mRNA两个表达水平的差异,并用GST pull-down试验检测各组细胞Rac1活性的差异。 (3)将Rac1-siRNA片段经脂质体转染至MCF-7 细胞内,24小时后,Western blotting和RT-PCR分别检测细胞Rac1和VASP表达水平的变化。 结果: (1) ICA对MCF-7 细胞的侵袭迁移能力均有明显的抑制作用,并且随浓度增加抑制作用逐渐增强,浓度为50μg/ml的ICA对细胞侵袭转移的抑制作用与阳性对照多西紫杉醇(docetaxel)(0.05μg/ml)作用相当(P)0.05); (2) EGF(15 ng/ml) 单独处理15 min后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组明显升高(P<0.05),ICA(50μg/ml) 单独处理24 h后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组明显降低(P<0.05),ICA(50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF(15 ng/ml) 刺激15 min,细胞内Rac1活性和VASP表达量与空白组无明显差异(P)0.05)。 (3)Rac1-siRNA转染组细胞中Rac1,VASP的mRNA和蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。 结论:ICA 可以有效抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力,这种抑制作用是通过降低细胞内Rac1的活性,进而减少VASP表达而实现的。
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