(目的)为了探讨鸡球虫融合基因真核表达质粒对鸡抗球虫的免疫保护作用及鸡IL-18在鸡球虫病核酸疫苗中的免疫佐剂作用,(方法)本研究应用重叠扩增PCR(SOE PCR)技术成功地将堆型艾美耳球虫(Ea)3-1E基因和α-tubulin基因片段利用引入的柔性连接肽(G4S)3进行连接,获得融合基因3-1E-linker-α-tubulin,以PVAX1为载体成功构建融合基因的真核表达质粒PVAX1-3-1E-α-tubulin。经重组质粒体外转染BHK-21细胞并观察到阳性结果后,将重组质粒PVAX1-3-1E-α-tubulin、PVAX1-IL-18、PVAX1-3-1E-α-tubulin+PVAX1-IL-18、PVAX1-3-1E和PVAX1-α-tubulin在21和28日龄分别免疫SPF雏鸡,35日龄攻击性感染Ea 5×104个孢子化卵囊。(结果)结果表明融合基因免疫组雏鸡的平均增重和相对增重极显著高于单基因免疫组,而且当有细胞因子IL-18协同免疫时,能显著减少克粪便卵囊排出数量,十二指肠病变计分减少率为71.19%,抗球虫指数为194.32。(结论)融合基因真核表达质粒的免疫保护效果明显高于单基因免疫组,免疫保护效果良好,鸡IL-18可作为核酸疫苗的一种理想的免疫佐剂。