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本文从三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)中克隆得到了smad3基因和smad5基因的c DNA全长序列。Smad3 c DNA序列全长为2052bp,其中1257bp的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)编码418个氨基酸,5’端非编码区162bp,3’端非编码区633bp。预测编码的蛋白分子量为47.28k Da,该蛋白理论等电点(PI)为6.09,由Signal P软件分析发现该蛋白含两个信号肽和一个Poly A尾。克隆得到的smad5基因的c DNA全长序列为1908bp,其中5’UTR有288bp,3’UTR有234bp,开放阅读框长度为1386bp编码461个氨基酸,该蛋白理论等电点为7.27,相对分子量为51.49k Da,该蛋白序列有一个信号肽序列和Poly A尾。通过对smad3和smad5基因在三角帆蚌不同组织中的表达分析发现,在血淋巴、肝胰腺、闭壳肌、外套膜、腮组织中均有表达,但表达存在一定的差异。Smad3和smad5都在肌肉组织中的表达量最高,其次是外套膜、肝胰腺和腮,而在血淋巴中的表达量最低;Smad4则在闭壳肌中表达量最高,在血淋巴中表达量最低。经嗜水气单胞菌刺激后,smad3和smad5两个基因在血细胞和肝胰脏中的表达都表现出显著或极显著的差异,而smad4在这两个组织中的表达则无显著差异。将基因扩增产物和表达载体PET-32a经Bam HI和Hind III双酶切之后,连接并成功构建了PET-32a-smad3原核表达质粒。将该质粒转入大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)中,加入IPTG至终浓度为1mmol/L,37℃诱导8h,得到大量融合蛋白,用Ni2+亲和层析镍柱纯化出质量较好的蛋白。