马尾松花粉提取物对前列腺肥大小鼠的预防作用及血清代谢组学的研究

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目的探究马尾松(Pinus massoniana)花粉提取物对丙酸睾酮复制实验性小鼠前列腺增生动物模型(BPH)的影响,研究灌胃松花粉提取物对模型小鼠的影响,同时对小鼠血清进行基于UPLC-QTOF-MS的代谢组学研究,进一步探究其作用机理。方法 4周龄雄性昆明种小鼠(20±2)g随机分为6组,分别为空白对照组(n=8)、BPH模型组(n=7)、20mg/kg·d(n=6)、40mg/kg·d(n=6)和80mg/kg·d(n=6)松花粉提取物组及非那雄胺(0.8 mg/kg·d)组(n=8)。实验前两周,三个松花粉组按体重每日灌胃相应剂量的MPPE,其余各组每日灌胃生理盐水。隔天称重,根据体重随时调节给药剂量。第三周开始,除空白组外,每组腹腔注射丙酸睾酮5mg/kg·d,非那雄胺组和松花粉组每日灌胃相应的非那雄胺和MPPE,空白组每日灌胃生理盐水。第6周末,测定前列腺指数和脾脏指数,EELISA试剂盒测定IL-1b、IL-6、TNF-a、PACP、DHT、NO及NOS的水平。超高压液相色谱四极杆飞行时间串联质谱技术(UPLC-QTOF-MS)检测小鼠血清中代谢物的变化,对六组小鼠的血清代谢谱采用偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)分类,并寻找潜在生物标志物。结果三种剂量的花粉提取物均可显著改善前列腺组织的形态学变化,组织形态基本得到恢复。可以降低前列腺指数,降低炎性细胞因子IL-1b、IL-6、TNF-a和DHT浓度及PACP、NOS的活性(P<0.01),减少NO的生成。代谢组学分析发现并鉴定了3个潜在生物标记物,分别为1-棕榈酰溶血磷脂酰胆碱、1-O-十六烷基-2-O-乙酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱和(Z)-13-二十二烯酰胺。PAF C-16与LysoP C(16:0)均与磷脂合成途径有关,在脂质代谢中起信号传导的作用。结论马尾松花粉提取物可以有效地降低BPH发生过程中炎症因子的升高,有效改善增生状况,调节脂质代谢物的水平,且有一定的剂量依赖效应。其可能的作用机制与抑制炎症及缓解脂质代谢紊乱相关。
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