一种感染猪的新附红体分子鉴定和形态观察

来源 :中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shi_bc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
从自然感染附红细胞体的浙江猪体内无菌采集血液,提取病原基因组,用血营养菌的16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增,得到两株长约1.5kb的扩增片段,将其克隆到pMD18-T载体后进行测序和分析.获得全长为1445bp两条16S rRNA基因序列,分析表明两者的同源性为99%,该序列与猫的类附红细胞体的16S rRNA基因序列同源性达到92%,与感染猪的附红体M.suis和M.parvum同源性仅为80%和81%.将该序列与1种支原体、16种血营养菌16S rRNA基因序列及进行比较,用MEGA5.1软件,neighbor-joiningprogram建立系统发育树,结果表明该附红细胞体同血营养菌的分类中的haemofelis group关系较近,与原来猪的两种附红体M.suis和M.parvum所属的haemominutum group的关系较远,证实该病原为一种感染猪的新种附红细胞体.姬姆萨染色血液涂片显示该病原为紫红色,蓝紫色的颗粒,有折光性;扫描电镜观察其大小约为0.3-0.5lμM,附着于红细胞表面,形态特征与目前我国流行的猪附红体没有显著区别.
其他文献
本研究测定了临潭株棒状体相关蛋白的多基因家族的基因序列及基因座结构.结果显示临潭株的棒状体相关蛋白(rap-1)基因座复杂的基因结构。1),存在三种rap-1基因类型(rap-1a,rap-1b and rap-1c);2),rap-1a和rap-1b包含多个基因拷贝;3),rap-1a基因存在基因多态性,包含两种rap-1a基因类型(命名为:rap-1a 61和rap-1a 67)同源性为95.
田鼠巴贝斯虫分泌抗原(BmSAl)是一个重要的诊断抗原候选分子,但全长蛋白的表达量少,也不宜纯化.本研究在此基础上,通过生物信息学分析,选取N末端信号肽后,C-末端跨膜区前,包含CPSF73:100_C功能区的228个氨基酸所编码基因片段,重组高效表达了一个可溶性截短型抗原,解决了完整蛋白重组表达纯化的困难.纯化的截短型抗原作为酶联免疫试验(ELISA)诊断抗原可清晰地区分阴性及阳性鼠血清,并与其
为了制备牛瑟氏泰勒虫病基因工程亚单位疫苗,根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因序列及黄牛IL-18基因序列,设计两对特异性引物,通过重组PCR技术将两段基因拼接后克隆到pMD-18-T载体,经过PCR、酶切和测序鉴定后,再亚克隆到pET-28a原核表,达载体,构建pET-28a-p23-IL-18重组原核表达载体,将鉴定正确的质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,在37℃用IPT
2012年9月,大庆某牧场7头奶牛出现羞明流泪、巩膜充血,皮毛脱落、皮肤增厚和龟裂等症状,肘、颈和肩部尤为严重;病畜眼巩膜有沙粒状包囊突起,身体局部皮肤呈“木板状”增厚,脱毛,潮红,肿胀;两眼上下眼睑肿胀,褶皱明显,是典型的“象皮病”症状,初步确定为牛贝诺孢子虫病.取病牛眼巩膜上包囊进行压片和镜检,发现大量球形包囊,包囊内含有大量月牙形的缓殖子;采集病牛的外周血,进行血液涂片并吉姆萨染色,在显微镜
本研究首先对新疆吐鲁番及和静地区该病的流行情况进行调查,筛选了阳性病料.采用PCR方法,利用设计的三对特异性引物分别扩增牛环形泰勒虫新疆株Tams1基因的三段区域(全长基因,扩增片段缺乏N端及C端疏水区、仅缺乏N端疏水区区域),构建三种重组表达载体,通过SDS-PAGE电泳分析比较三种重组质粒蛋白表达量及表达形式,最终筛选获得高可溶性表达重组质粒.优化其表达条件,并对纯化的蛋白进行Western
为研究我国南方四省区羊泰勒虫病的流行情况,分别采用血涂片镜检和PCR方法对采自我国广西壮族自治区、贵州省、广东省和重庆市部分地区的180份份羊血液样品进行检测,并对部分阳性样品进行测序分析.PCR检测结果显示,在贵州省、广东省和重庆市的样品中均有羊泰勒虫感染,其中吕氏泰勒虫平均阳性率分别为46.8%(29/62)、90.9%(30/33)和12.7(7/55),绵羊泰勒虫和尤氏泰勒虫均为阴性;广西
为了掌握近年来中国羊泰勒虫病的流行现状,并对其分离株进行分子分类学鉴定.对分离自2005-2011年间的羊血液基因组以及蜱基因组,依次用吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫和绵羊泰勒虫特异引物进行PCR扩增.对阳性样品进行18S rRNA基因的特异扩增和测序分析,并建立系统发育树.PCR扩增表明在中国所调查的4省9县市,羊泰勒虫病的流行存在明显差异.甘肃省羊泰勒虫病的发病率和感染率较高,主要呈吕氏泰勒虫和尤氏泰
Ovine eperythrozoonosis is a zoonosis caused by Mycoplasma ovis(M.ovis) which parasites on erythrocytes and plasma.At present,there are several methods to diagnose eperythrozoonosis,but the result is
为了解猪附红细胞体的感染机制,本试验利用酵母双杂交方法,筛选与猪附红细胞体α-烯醇化酶相互作用的宿主蛋白.采用定点突变引物和Overlap-PCR方法扩增猪附红细胞体α-Eno基因的全长序列,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒转化至酵母菌株Y2H中,检测诱饵载体有无毒性作用和自激活现象,利用酵母双杂交系统从猪外周血单个核细胞(PBMC)文库中筛选与α-Eno相互作用
为筛选猪附红细胞体α-烯醇化酶与宿主互作的靶蛋白,本试验构建了可以用于酵母双杂交技术筛选的α-烯醇化酶的诱饵载体pGBKT7-Eno.采用Overlap-PCR技术从感染猪附红细胞体血液DNA中扩增了Eno基因全长序列,定向克隆到酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组诱饵载体转化酵母Y2H,并验证其在酵母细胞中毒性作用和有无自激活现象.结果显示,本试验成功构建了诱饵载体pGBKT7-Eno,并证