耐药性和毒力影响化脓隐秘杆菌的遗传分化

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化脓隐秘杆菌Trueperella pyogenes是隐秘杆菌属中毒力最强的病原体,是经济型家畜(牛、羊和猪)的一种条件性致病菌,大部分寄居在健康动物的乳房、泌尿生殖道、呼吸道和胃肠道黏膜。该菌常与大肠杆菌、绿脓杆菌和坏死梭杆菌(厌氧)共同作用,引发脏器化脓等慢性病,甚至可以在短时间内直接导致抵抗力较差的宿主死亡。而细菌耐药性早己成为近半个世纪以来最引人注目的问题,对养殖业而言,缺少像医院一样的正规药物监护,抗生素的实际使用浓度远远高于适用标准上百甚至上千倍,筛选到耐药菌株的机率远远高于人类中筛选到的机率。本次研究共从米亚罗林麝养殖场林麝化脓病灶中分离到36株化脓隐秘杆菌,用BOX-PCR扩增指纹图谱分析了所有菌株基因组之间的关系。用琼脂稀释法分析了所有菌株对诺氟沙星、恩诺沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、链霉素、安普霉素、庆大霉素、阿米卡星、林可霉素、阿奇霉素、氨苄西林、头孢唑林、头孢噻肟和甲氧苄氨嘧啶的敏感性。化脓隐秘杆菌表达一些在入侵过程中跟细菌粘附和殖民化形成有关的毒力因子,如胞外溶血素(PLO)、胶原绑定蛋白(CbpA)、唾液酸苷酶(NanN,NanP)以及菌毛形成控制基因。这些基因被同时在化脓隐秘杆菌DNA和RNA中用普通PCR进行了检测。BOX-PCR指纹图谱用Cross Checker软件分析并基于UPGMA算法建立系统树图;药物敏感性检测结果被分配到1/0二元矩阵用Cross Checker软件分析并基于UPGMA算法建立系统树图。通过BOX-PCR指纹图谱和药物敏感性分析,所有的化脓隐秘杆菌被分成3个类群,第一个类群主要包括高抗性菌株,第三个类群主要包括低抗性或者敏感性菌株。这种分类主要是由于贝塔内酰胺类的氨基糖苷类抗生素长期应用所形成的。毒力基因检测结果表明这些被测基因普遍存在于36株化脓隐秘杆菌基因组中,只有一些不太重要的如菌毛形成基因fimC,fimE和fimG在部分菌株没有检测到。而且总的看来,敏感型化脓隐秘杆菌具有较为全面的毒力基因,而抗性较强的菌株则有部分不太重要的毒力基因被丢失或者不表达。耐药性主导细菌进化,而且毒力基因也有影响但是不明显。
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