【摘 要】
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本试验通过RT-PCR方法从旋毛虫肌幼虫总cDNA中克隆获得旋毛虫抗原基因p43与p53,并将p43、p53基因通过T4连接酶分别连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,免疫前1d在小鼠胫前肌注
【机 构】
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东北农业大学动物医学学院 黑龙江哈尔滨150030
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
论文部分内容阅读
本试验通过RT-PCR方法从旋毛虫肌幼虫总cDNA中克隆获得旋毛虫抗原基因p43与p53,并将p43、p53基因通过T4连接酶分别连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,免疫前1d在小鼠胫前肌注射0.5％盐酸普鲁卡因50μl/只.每隔2周免疫一次,于三免后第2周,每个试验组小鼠感染100蚴旋毛虫肌幼虫.通过应用SYBR-Green R荧光定量方法检测小鼠肠上皮细胞TLR2及TLR4表达量变化情况.结果显示在TLR2检测中,除了在感染旋毛虫后21d的TLR2表达增大明显外,其余各个试验时间点其表达量都维持在较低水平,但是在二免后,试验组R、Ⅱ、Ⅲ与PBS组相比差异极显著(P＜0.01)；三免后,试验组Ⅰ与PBS组相比差异不显著(P＞0.05);试验组Ⅱ与PBS组相比差异显著(P＜0.05),试验组Ⅲ与PBS组相比差异极显著(P＜0.01)；在TLR4检测中,其试验结果显示,随着免疫时间的增长,TLR4的表达量有所增加,在攻虫后7d TLR4表达量达到各个试验时间点的最高值,随后表达量开始下降,其中攻虫后21d TLR4表达量仍有较高的表达.本试验通过检测小鼠小肠TLR2与TLR4的表达量变化情况,从而为进一步研究旋毛虫免疫机理与致病机制奠定了一定的理论基础.
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