添加不同培养成分的IVM液对未成熟卵体外培养的比较研究

来源 :中华医学会第六次全国生殖医学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kmask
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  目的:探讨添加两种培养成分的体外培养液对未成熟卵母细胞的培养效果.材料与方法:①选择2011年3月至2011年10月期间,于我院生殖中心接受ICSI治疗的77名不孕患者,平均年龄(35.94±5.36)岁,平均不孕年限(5.51±4.82)年,共收集未成熟卵177枚.②IVM培养液的配制,A组(含激素):添加0.075 IU/mL FSH及0.075IU/mL LH至IVM培养液(SAGE,USA)配成;B组(含成熟卵泡液):50%IVM培养液,与50%人成熟卵泡液配成③未成熟卵母细胞的采集:ICSI周期采用常规促排卵方案,当最大卵泡直径达18mm时注射HCG,36h后于阴道B超引导下取卵.取卵后4h,用透明质酸酶去除颗粒细胞,生殖泡仍存在即生殖泡期(germinal vesicle stage,GV期)卵,生殖泡破裂但尚未排出第一极体即MI期(metaphase I stage,MI期)卵,将这两类未成熟卵母细胞收入本研究中.④未成熟卵的体外培养:采取微滴培养,30μl/滴,1~2枚/滴.配制培养液滴在使用前于37℃,6% CO2孵箱中平衡至少4h.将收集的未成熟卵母细胞随机放人上述两组不同培养液中,于37℃体积分数5% CO2培养箱中培养至48h,每24h倒置显微镜下观察卵母细胞的形态,以第一极体排出为卵母细胞成熟的标志.对MII卵进行ICSI,ICSI操作后,置于Quinns培养液(SAGE,USA)中培养.结果与结论:B组对未成熟卵母细胞尤其对于MI期卵母细胞的体外培养效果要优于A组,人成熟卵泡内可能含有一些未知的利于卵母细胞成熟的因子,故对未成熟卵母细胞尤其是MI期卵母细胞进行体外培养时应优先选择添加成熟卵泡液进行培养。
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