siRNA特异性沉默TLR4基因对人肝癌细胞株增殖和凋亡的影响以及机制的初步研究

来源 :中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mllx03
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  目的:探讨siRNA特异性沉默肝癌细胞株TLR4基因后对人肝癌细胞株增殖和凋亡的影响.方法:合成TLR4特异性的siRNA 3对,随机siRNA阴性对照1对,FAM标记的siRNA阴性对照1对;取适量的FAM标记的siRNA和Lipo2000,使siRNA:Lipo2000的比例为0.5∶1、1∶1、1.5∶1、2∶1、2.5∶1转染入HepG2细胞,筛选出最佳的转染条件;将合成好的siRNA分别转入人肝癌细胞株HepG2,运用RT-PCR和Western blot方法筛选出具有最佳沉默效率的siRNA;用具有最佳沉默效率的TLR4 siRNA转染HepG2,MTT检测转染前后细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测转染前后细胞凋亡能力的变化;以Western blot法检测转染前后TLR4下游通路相关蛋白的表达.
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