【摘 要】
：
本文根据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,用OLIGO6.0设计PCR引物,对鸭源致病性大肠杆菌pilA基因进行PCR扩增,原核表达及免疫原性检测,获得如下结果:对扩增的pilA基因进行pMD18-T载体克隆,通过对pMD18-T-pilA及pET-32a(+)进行BamHI、HindⅢ双酶切,T4DNA连接酶连接,将pilA基因定向插入pET-32a(+),经BamHI和HindⅢ双
【机 构】
：
四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,6250143;双汇实业集团有限公司技术中心,河南,漯河,462000
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会
论文部分内容阅读
本文根据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,用OLIGO6.0设计PCR引物,对鸭源致病性大肠杆菌pilA基因进行PCR扩增,原核表达及免疫原性检测,获得如下结果:对扩增的pilA基因进行pMD18-T载体克隆,通过对pMD18-T-pilA及pET-32a(+)进行BamHI、HindⅢ双酶切,T4DNA连接酶连接,将pilA基因定向插入pET-32a(+),经BamHI和HindⅢ双酶切鉴定表明,成功构建重组表达质粒pET-32a-pilA,并转化入表达宿主菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,表达产物大小为36kD左右.表达产物用镍柱亲和层析对其进行纯化,获得较好的纯化效果.纯化后产物两次免疫雏鸭,两周ELISA抗体效价达1:1600,对同源菌株GH1.2的感染具有良好保护效果.
其他文献
用微量元素氨基酸螯合物按不同比例替代保育猪饲粮中无机微量元素,研究其对保育猪生产性能、血清生化指标以及无公害指标的影响。实验用0、12.5％、25.0％和37.5％的氨基酸螯合铁、铜、锌、锰分别替代基础日粮中的相应无机元素的0(1组,对照组)、25％(2组)、50％(3组)和75％(4组),4个处理,每处理3个重复,每个重复20只猪,实验期35d。结果表明:与对照组(1组)比较,2、3、4组的平均
试验采用2×2析因设计。选择25kg左右的"杜长大"三元杂交猪96头,分成4组,每组6个重复,每个重复4头。对照组(CS0,Cr0)喂基础饲粮,酵母铬组(Cr1)在基础饲粮中添加酵母铬(生长期和肥育期分别添加200、300ugCr/kg),半胱胺组(CS1)在基础饲粮中添加半胱胺(生长期和肥育期分别添加120、170mgCS/kg),复合组(CS1-Cr1)在基础饲粮中同时添加酵母铬和半胱胺,分生
选择48头平均体重约28kg的杜×长×大三元杂交生长猪随机分为A、B、C、D 4个组,每组3个重复,每个重复4头猪。用氨基酸微量元素(铁、铜、锌、锰)螯合物分别替代饲粮中0％、25％、50％和75％的相应的无机微量元素饲喂56天。结果表明:B组日增重显著高于A组(P<0.05),饲料增重比(F/G)显著低于A组(P<0.05);A组饲粮粗蛋白质消化率低于D组(P<0.05);各组血清中微量元素铁(
本文对不同成份的霉菌毒素吸附剂的选择性吸附能力进行了比较,发现不同来源的吸附剂对维生素C和维生素D的吸附能力有所不同。文章还对维生素C及维生素E干扰下吸附剂对赭曲霉毒素A的吸附能力进行了研究。
饲养试验选用1日龄的良凤花鸡600羽,随机分为4组(每组设3个重复,每个重复50羽),A组为对照组,饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,B、C、D组的饲粮为分别以300、500、700U/kg的植酸酶取代基础饲粮中的30％、50％、70％的磷酸氢钙(DCP)。8周的饲养试验结果表明:与对照组相比,B、C、D组的0～4周龄的平均日增重(ADG)分别提高了0.90％(P>0.05)、6.29％(P0.05)、2
本文选用鸡痘病毒作为载体,将FMDV的衣壳蛋白前体P1-2A和蛋白酶3C基因插入到鸡痘病毒表达载体中,构建重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL3CP1,并与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞,通过药物BrdU加压筛选、间接免疫荧光实验以及Westernblotting方法检测等方法筛选并获得了一株重组鸡痘病毒.重组鸡痘病毒vUTAL3CP1接种鸡胚成纤维细胞连续传30代,分别对第1、5、10、
蟛蜞菊易生长,易繁殖,营养价值高。在南方,蟛蜞菊是一种具有较高饲用价值的待开发饲料资源。其营养期的营养成分如下:粗蛋白(CP)15.67％,粗纤维(CF)12.42％,粗脂肪(EE)3.87％,无氮浸出物(NFE)38.22％,粗灰分(Ash)17.32％,钙(Ca)1.96％,磷(P)0.29％。肉兔对蟛蜞菊各营养成分消化率分别为CP68.72％,EE54.27％,Ash2.65％,Ca72.3
本试验根据胸膜肺炎放线杆菌外膜脂蛋白(omlA)、apx毒素和英膜多糖(cp)三个不同型特异性基因,选用和设计了15对引物,并从扩增的17个靶基因中选用15个靶基因用于制备胸膜肺炎放线杆菌基因分型的基因芯片.用优化后的多重PCR方法对胸膜肺炎放线杆菌不同标准血清型菌株和分离株进行荧光探针标记,标记后与分型基因芯片进行杂交.结果9个不同标准血清型菌株与分型基因芯片杂交后都有各自独特的杂交模式,3个用
猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(ActinobacilluspleuropneumoniaeAPP)引起的细菌性呼吸道传染病,该病的流行给世界养猪业带来了巨大的经济损失,Apx(actinbacilluspleuropneumoniaetoxin,Apx)毒素是由胸膜肺炎放线杆菌分泌的一类溶血毒素,在胸膜肺炎放线杆菌致病过程中,Apx毒素起了重要的作用,本文就该致病菌Apx毒素的最新研究进展
目的:通过检测AA肉仔鸡新城疫HI抗体效价的变化,以测定复方杜仲对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响.方法:将224只1日龄AA肉鸡随机分成4组,每组56只,第Ⅰ组为复方杜仲低剂量组;第Ⅱ组为复方杜仲中剂量组;第Ⅲ组为复方杜仲高剂量组;第Ⅳ组为对照组,试验期为42d.每周六在各组鸡群中随机抽6只鸡采血,分离血清,测定NDVHI抗体水平.结果:试验组鸡群血清NDVHI抗体水平在试验期内(0～42d)均高于对