菘蓝抗菌肽Li-AMP1对辣椒疫霉病菌及线虫的抑制作用

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抗菌肽(antimicrobial peptide,AMP)是一种普遍存在于动植物体内,具有广谱抗性、抑菌活性强,作用机理多样、对高等生物细胞无毒害、自生抗逆性强等特点的一类小分子多肽的统称。近年来,由于抗生素的滥用,导致许多抗药细菌的产生,引起了国内外许多研究者的重视,因此抗菌肽作为代替品被广泛的开发应用。其中植物源抗菌肽,来源广泛、种类繁多、安全可靠,成为研究抗菌肽不可或缺的邻域。Li-AMP1是来自中草药植物菘蓝中的一个新的抗菌肽,对青枯病原菌、番茄溃疡病原菌、水稻白叶枯病菌、水稻细菌性条斑病菌,小麦苗枯病菌等都有抑菌作用。本研究将编码抗菌肽LiAMP1的基因命名为LiR1,并构建了该基因的枯草芽胞杆菌表达载体,成功表达了Li-AMP1抗菌肽。研究结果表明,与对照空载体菌株相比,含LiR1基因的枯草芽胞杆菌菌株在摇培36h后出现了大量的扭曲、变形或者破碎的菌体,可见LiR1基因的表达产物对寄主细胞产生了致死的作用。利用含LiR1基因的枯草芽胞杆菌菌株发酵液处理烟草叶片后接种辣椒疫霉病菌,避光处理2天,统计并分析辣椒疫霉病菌侵染后病斑大小,结果表明:Li-AMP 1对辣椒疫霉病菌的抑病率达到21.6%。利用Li-AMP1对秀丽隐杆线虫进行了抑制线虫相关研究。滤纸片法筛选该基因对线虫的抑制率,以选择指数为指标(选择指数=(测试菌中线虫数量-对照菌中线虫数量)/线虫总数),Li-AMP1选择指数为-44.34%,结果显示Li-AMP1具有一定的抑制线虫作用。线虫后代数量统计结果显示:与空载体菌株相比,用含LiR1基因的菌株喂食的线虫产卵量降低了20.2%。本研究分离到一个新的来源于中草药的抗菌基因LiR1,在一些植物病虫害的防治中,具有很好的应用前景。
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