高密度接种对TGF-β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化的影响

来源 :第八届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kellyfly
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  背景:细胞密度是影响细胞分化与去分化状态的因素之一,对于细胞密度在TGF-beta1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化中的作用尚缺乏深入研究。目的:观察细胞密度对TGF-β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化的影响。方法:将HaCaT细胞分别以103/cm2和105/cm2接种于六孔板,使用2ng/mL的TGF-β1作用48h,观察细胞形态变化,应用Realtime PCR和western blot分别检测E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和ZO-1的转录水平和表达水平:免疫荧光检测E-Cadherin和Vimentin表达。结果:低密度组的HaCaT细胞在TGF-β1处理48h后细胞间隙变大,细胞形态由多角形变为长梭形,高密度组的细胞间隙变大,但形态变化不明显;Realtime PCR和westem blot显示两组上皮细胞标志物E-Cadherin和ZO-1的转录及表达均下调,但高密度组下调比例低于低密度组,间充质细胞标志物N-Cadherin和Vimentin的转录及表达均上调,上调比例无显著差异;免疫荧光结果发现,高密度组表达E-Cadherin的细胞比率明显高于低密度组,Vimentin的表达无显著差异。结论:高接种密度降低TGF-β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化的效率。
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