【摘 要】
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目的:克隆分析中国特有小型猪来源的猪内源性反转录病毒(PERV)囊膜基因(env),比较不同来源毒株的异同及系统进化关系.方法:应用RT-PCR的方法分别从中国实验小型猪、巴马香猪及五指山小型猪外周血淋巴细胞中扩增PERVenv基因,克隆入T载体后测序;随后以PCR方法对克隆PERVenv基因进行分型检测;最后采用DNAsis及DNAstar软件对克隆的env基因和国外毒株env基因进行同源性及系
【机 构】
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广西兽医研究所,广西,南宁,530001;军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850 广西兽
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
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目的:克隆分析中国特有小型猪来源的猪内源性反转录病毒(PERV)囊膜基因(env),比较不同来源毒株的异同及系统进化关系.方法:应用RT-PCR的方法分别从中国实验小型猪、巴马香猪及五指山小型猪外周血淋巴细胞中扩增PERVenv基因,克隆入T载体后测序;随后以PCR方法对克隆PERVenv基因进行分型检测;最后采用DNAsis及DNAstar软件对克隆的env基因和国外毒株env基因进行同源性及系统进化分析比较.结论:PERV中国株的进化与A、B、C亚型分类有关,与宿主、分布地域关系不大,且PERV-A亚型与C亚型的亲源关系更近于B亚型.
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根据GenBank上发表的猪IL-4和IL-2基因序列,设计引物.从猪外周血淋巴细胞中提取基因组RNA,采用RT-PCR技术,扩增出猪白细胞介素-4和白细胞介素-2基因并进行了序列分析.琼脂糖凝胶电泳显示猪白细胞介素-4扩增片段约为400bp,猪白细胞介素-2扩增片段约为500bp.序列分析结果表明,猪白细胞介素-4基因序列全长421bp,开放阅读框架内402个核苜酸,共编码133个氨基酸,分子量
对不同CpG序列在猪群、鸡群中的免疫佐剂作用进行了研究.设计并合成了16种含不同CpG基序的DNA序列,与新城疫Ⅳ系疫苗联合对14日龄的罗曼雏鸡进行了免疫研究,免疫剂量为每只鸡20ug.分别于免疫前、免疫后的7、14、21d采血,检测NDV的HI抗体水平、淋巴细胞增殖反应、血液中的T淋巴细胞比例,并在免疫后21d对各免疫组的免疫器官进行了组织学检测.通过对各项指标的综合比较,初步筛选了4个免疫佐剂
根据GeneBank中猪IFN-γ基因设计引物对,利用RT-PCR技术克隆并测定了猪外周血白细胞IFN-γ基因,定名为poIFNR1,其ORF长度为501个核苷酸,其成熟肽包含144个氨基酸.将其成熟肽基因序列根据大肠杆菌密码子的偏嗜性改造后克隆入原核表达载体pBV220中,鉴定后筛选表达重组菌进行发酵培养、温度诱导后,收集菌体超声波破碎后提取包涵体并进行初步纯化,利用胱氨酸-半胱氨酸再氧化法对纯
猪增生性肠炎(PPE)是由细胞内劳森菌(LI)引起的一种猪常见的接触性肠道传染病.临床症状主要表现为间歇性下痢,食欲减退,生长速度减缓,饲料利用率明显下降等.对PPE的病原学、发病机理、流行病学、临床症状、诊断及综合防制等方面进行了介绍.
应用胸膜肺炎放线杆菌套式PCR和实时荧光PCR检测方法分别检测了不同来源的猪鼻拭子、肺、扁桃体等494份样品.套式PCR77份阳性,实时荧光PCR62份阳性,前者的阳性完全覆盖了后者的阳性,两者符合率为97﹪(479/494).两种方法均可应用于猪传染性胸膜肺炎的诊断和监测.
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