【摘 要】
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为快捷有效的检测转Bar基因抗除草剂大豆,本研究利用已制备的抗除草剂Bar基因编码蛋白(PAT)单克隆抗体和多克隆抗体,建立PAT蛋白双抗夹心ELISA检测方法,对转Bar基因抗除草剂大豆不同组织材料进行定量检测.结果显示最佳检测条件为：捕获抗体浓度为0.125μg/mL,包被酶标板,37℃孵育1h后4℃静置过夜,检测样品37℃孵育1.5h,检测抗体浓度为6.25μg/mL,37℃孵育1.5h；检
【机 构】
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吉林省农业科学院植物保护研究所,东北作物有害生物综合治理重点实验室,吉林省农业微生物重点实验室,公主岭136100
【出 处】
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中国植物保护学会2015年学术年会
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为快捷有效的检测转Bar基因抗除草剂大豆,本研究利用已制备的抗除草剂Bar基因编码蛋白(PAT)单克隆抗体和多克隆抗体,建立PAT蛋白双抗夹心ELISA检测方法,对转Bar基因抗除草剂大豆不同组织材料进行定量检测.结果显示最佳检测条件为：捕获抗体浓度为0.125μg/mL,包被酶标板,37℃孵育1h后4℃静置过夜,检测样品37℃孵育1.5h,检测抗体浓度为6.25μg/mL,37℃孵育1.5h；检测PAT蛋白的最低检测限0.04ng/mL,大豆蛋白体系中为8ng/mL；重复性变异系数小于3％.利用上述检测条件,对笔者单位创制的转Bar基因抗除草剂大豆进行PAT蛋白定量检测,成功的在根、茎、花、叶和种子不同部位检测到该蛋白的表达.本研究运用双抗夹心ELISA定量检测转Bar基因抗除草剂大豆,可为转Bar基因抗除草剂大豆及相关产品的检测提供参考.
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