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目的:本研究将EGFR/PI3K/AKT信号途径与Wnt/β-catenin信号途径的相互作用以及EGFR-TKI吉非替尼抑制肺癌干细胞的机制加以假设并予佐证,为吉非替尼治疗肿瘤的机制带来新的观念。方法:体外培养EGFR基因突变阳性的人肺腺癌细胞株PC-9,通过SP法分析EGFR-TKI吉非替尼以及EGFR/PI3K/AKT信号通路各级抑制剂对肺癌干细胞的作用效应;采用Western blot法鉴定该信号途径各级抑制剂对上下游蛋白表达的影响;采用间接免疫荧光抗体实验方法检测细胞中β-catenin的表达及亚细胞定位;应用SP法检测siRNA沉默β-catenin基因对肺癌干细胞的作用效应;将PC-9细胞接种裸鼠皮下,观察皮下肿瘤生长情况及吉非替尼或顺铂干预对移植瘤生长的影响;采用免疫组化法检测裸鼠移植瘤中β-catenin的表达;将各组移植瘤分解为单细胞悬液后,通过SP法检测吉非替尼或顺铂对肺癌干细胞的作用效应;采用Transwell小室迁移实验测定两种药物处理对肿瘤细胞迁移能力的影响。结果:表皮生长因子(hEGF)能够促进侧群细胞比例的升高,而吉非替尼及EGFR/PI3K/AKT通路各级抑制剂则显著抑制侧群细胞的比例。同时免疫荧光结果显示,hEGF可以使细胞浆和细胞核内β-catenin的表达水平增高,而加入吉非替尼则能够通过抑制EGFR/PI3K/AKT信号途径从而有效抑制β-catenin的表达。敲除β-catenin基因能够使侧群细胞的比例显著下降。裸鼠体内实验表明,与顺铂处理组及对照组相比,口服吉非替尼对EGFR基因突变阳性的人肺腺癌PC-9细胞株移植瘤疗效显著,并能够明显降低移植瘤细胞中侧群细胞的比例,同时使肿瘤细胞的迁移能力下降。结论:EGFR-TKI吉非替尼能够通过EGFR/AKT/β-catenin信号途径抑制肺癌干细胞的生存。这充分表明吉非替尼可能作为一种潜在的靶向肿瘤干细胞的药物,为将来更多地开拓针对肿瘤干细胞的治疗提供新的探索方向,同时为进一步深入研究β-catenin高表达在肺腺癌吉非替尼获得性耐药中的作用和分子机制提供实验依据和理论基础。