【摘 要】
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PCR扩增了蓝细菌体内偏码ADP-葡萄糖焦磷酸羧化酶(ADPG PPase)的agp基因,通过DNA体外重组,以红霉素抗性基因部分取代agp基因片段,构建了既含agp基因上游及下游序列、又携带选择性标记——红霉素抗生——的pUCAE质粒.该质粒转化野生型集胞藻6803细胞,获得了能在含红霉素的培养基上正常生长的突变株.对该突变株基因组DNA的PCR扩增,结果表明,在agp基因上确实发生了缺失突变.
【机 构】
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清华大学化工系生物化工研究所(北京) 清华大学生物科学与技术系(北京)
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PCR扩增了蓝细菌体内偏码ADP-葡萄糖焦磷酸羧化酶(ADPG PPase)的agp基因,通过DNA体外重组,以红霉素抗性基因部分取代agp基因片段,构建了既含agp基因上游及下游序列、又携带选择性标记——红霉素抗生——的pUCAE质粒.该质粒转化野生型集胞藻6803细胞,获得了能在含红霉素的培养基上正常生长的突变株.对该突变株基因组DNA的PCR扩增,结果表明,在agp基因上确实发生了缺失突变.同时,突变株中ADPG PPase的活性已经消失,其细胞生长速度较野生塑细胞快,胞内叶绿素含量比野生型细胞高,表明该突变株具有较高的光合效率.在突变株中未检测到糖原的存在.而光合自养时PHB的百分含量可由野生株的3.4﹪提高到15﹪.
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