大鼠LFs诱导及协助BMSCs向韧带组织工程学种子细胞分化的效果观察

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<正>目的:通过LFs对BMSCs进行诱导后细胞活性及增殖能力、韧带相关蛋白的分泌、细胞诱导效果。方法:通过密度梯度离心法获得大鼠BMSCs,通过组织块消化法获得LFs细胞,将细胞传至第三代。根据细胞的培养方式不同分为三组即A组骨髓间充质干细胞组,B组生长因子诱导组(bFGF-1和TGF-β,浓度均为10mg/ml),C组LFs诱导组,每组细胞均为1×105/孔。将三组细胞培养12天,并通过倒置显微镜观察细胞生长,MTT法绘制细胞生长曲线。在三组细胞培养第12天时,通过免疫组化法分析Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的产量,通过天狼猩红和固绿染色观察细胞总胶原蛋白和非总胶原蛋白产量,通过实时荧光定量PCR检测韧带特异性基因的表达情况(Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、韧粘素C、波形蛋
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