调控PRRSV介导先天性免疫应答的microRNA筛选及其功能研究

来源 :第十一届北京畜牧兽医青年科技工作者“新思想 新观点 新方法”论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lgshow
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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害养猪业健康发展的重要疫病之一,给养猪业造成了巨大的经济损失.由于PRRSV具有广泛变异、持续性感染、免疫抑制以及免疫逃逸等特征,目前疫苗产品不能发挥十分有效的保护作用,因此研究PRRSV的致病机制、开发抗病毒药物可以为PRRS的防控提供更多帮助.microRNAs(miRNAs)是一类通过转录后调控来调节基因表达的非编码小RNA,越来越多的研究证明miRNAs在调控病原感染和宿主的免疫应答过程中发挥重要作用,鉴定参与宿主细胞免疫应答过程中的miRNAs以及研究它们的生物学功能对于阐明病毒的复制及致病机理至关重要.本研究利用荧光定量PCR方法确定PRRSV感染原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)和非洲绿猴肾细胞(MARC-145)后表达量发生变化的miRNAs,筛选出与先天性免疫应答和Ⅰ型干扰素信号通路相关的靶基因.利用分子生物学软件预测miRNAs与靶基因3UTR的结合位点,合成miRNA mimics,利用双荧光素报告系统验证miRNAs与靶基因3UTR的结合位点.进一步探索研究miRNAs参与PRRSV免疫抑制或免疫逃逸的相关生物学功能.本研究的创新点在于筛选出与PRRSV先天性免疫应答和Ⅰ型干扰素信号通路相关的miRNAs和靶基因,有望为PRRSV新型疫苗和药物的研制提供新靶点,也为进一步明确PRRSV诱导免疫抑制的机理提供依据.
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