瓜叶菊下胚轴再生体系的建立

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瓜叶菊(Senecio cruentus)是重要的盆栽花卉,因其具有丰富的花色和多种着色模式,成为研究花色形成机理和着色模式的重要材料。建立高效的再生体系,对于建立瓜叶菊遗传转化体系进行功能基因验证和开展分子育种具有十分重要的意义。本文以瓜叶菊’小丑’白斑/洋红色品种的下胚轴为外植体,MS为基本培养基,建立了’小丑’白斑/洋红色品种再生体系。结果表明,白斑/洋红色品种种子在MS培养基上播种后,经过7d持续黑暗培养,下胚伸长最长。下胚轴在MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的培养基上,20d即可诱导出愈伤组织,30d后出现不定芽芽点,40d后不定芽分化率可达57.8%。在此基础上,对瓜叶菊下胚轴卡那霉素抗性临界值进行了筛选,发现下胚轴在含卡那霉素浓度为5mg/L的分化培养基上培养时,不再形成愈伤。不定芽对卡那霉素十分敏感,在仅含1 mg/L卡那霉素的生根培养基上培养时,生根受到严重抑制。因此,瓜叶菊下胚轴遗传转化形成愈伤组织的卡那霉素选择压设为5mg/L,生根培养基卡那霉素选择压为1 mg/L时为最佳,上述结果为建立高效的瓜叶菊遗传转化体系及转基因功能验证奠定了很好的基础。
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