血清MicroRNAs作为巨大儿生物标志物的研究

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目的:巨大儿是指出生体重≥4000克的新生儿,我们前期的研究提示巨大儿胎盘中存在miRNA的异常表达。是否在血液中能寻找到合适的miRNA作为巨大儿早期生物标志物。方法:采用病例-对照研究设计,运用TLDA芯片通过巨大儿孕母和正常体重胎儿孕母孕16-20周和分娩前一周血清样本比较,建立血清miRNA差异表达谱,选择差异表达基因倍数在2-3倍以上的miRNA进行单个样本的实时荧光定量PCR验证,通过多阶段筛选和验证获得巨大儿血清miRNA特异表达谱。结果:在孕早中期组有16个△△Ct超过2倍变化的miRNA在非糖尿病性巨大儿及正常儿孕母晚期血清中存在差异表达,其中14个下调,2个上调。通过多阶段单个样本验证,在巨大儿孕16-20周孕妇血清中miRNA-376a低表达。进一步分析孕妇早中期血清miRNA-376a预测巨大儿的价值,绘制ROC曲线图,发现其对巨大儿早期诊断的AUC【Area Under the ROC Curve,ROC曲线(Receiver Operating Characteristic Curve,受试者工作特征曲线)下面积】为67.8%,(sensitivity=96.7%and specificity=40.0%)。在孕晚期组有1 1个△△Ct超过3倍变化的miRNA在巨大儿及正常儿孕母晚期血清中存在差异表达,其中10个下调,1个上调。通过多阶段单个样本验证,发现在巨大儿母亲孕晚期母血中miRNA-21始终保持低表达。进一步分析孕妇血清miRNA-21预测巨大儿的价值,绘制了ROC曲线图,发现其对巨大儿早期诊断的AUC[Area Under the ROC Curve,ROC曲线(Receiver Operating Characteristic Curve,受试者工作特征曲线)下面积]为67.7%,(sensitivity=66.7%and specificity=70.0%)。结论:非糖尿病巨大儿与健康对照孕妇孕早中期和孕晚期血清之间存在明显的miRNA差异表达谱,孕早中期母体血清中miRNA-376a孕晚期母体血清中miRNA-21有望成为预测非糖尿病巨大儿的分子标志物。
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